石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒使用说明

主要用途

YIJI石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上，通过氧化剂处理，使黑色素由棕色变成无色，来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于各种石蜡包埋组织切片中的黑色素成分，尤其是肿瘤细胞的黑色素去色检测。产品即到即用，操作简捷，性能稳定，去色明显。

技术背景

黑色素（melanin）是一组棕黑色的沉积色素，不含铁而含硫，不溶于水和有机溶剂，能在强碱中长时间后被溶解，被强氧化剂脱色。黑色素与蛋白质结合，形成复合物，通常存在于皮肤、头发、眼睛（视网膜）和大脑黑质（substantia nigra）中。黑色素细胞（melanocytes）产生黑色素，存储在细胞浆的黑色素颗粒中。通过多巴氧化酶（DOPA Oxidase）的作用，使黑色素转化成黑色的多巴黑色素（dopa melanin）。黑色素的显著增加，与黑色素瘤（melanoma1）有关。基于黑色素颗粒，造成细胞结构模糊，影响其它化学和免疫染色，通过利用黑色素的去色能力，使用强氧化剂高锰酸钾（potassium permanganate）处理，使黑色素由棕色变成无色，既能识别和证明黑色素，又能显示清晰的细胞结构。

产品内容

YIJI脱蜡液（Reagent A）         毫升

YIJI脱水液（Reagent B）    毫升

YIJI强化液（Reagent C）    毫升

YIJI澄清液（Reagent D）    毫升

YIJI清理液（Reagent E）  毫升

YIJI氧化液（Reagent F）     毫升

YIJI去色液（Reagent G）  毫升

产品说明书  1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月

用户自备

小型染色缸：用于组织染色操作

烘箱：用于脱蜡处理

光学显微镜：用于组织染色后观察分析

实验步骤

• 脱蜡处理

• 取出10片待测的石蜡包埋的5微米厚组织切片 

• （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟

• （选择步骤）室温下静置15分钟

• 按下表依次放进小染色缸里孵育

• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）

二、 去色处理

• 小心加上xx微升YIJI氧化液（Reagent F），铺满整个样品表面

• 室温下，孵育5分钟（注意：可以延长至2小时，例如眼晴组织）

• 小心移去切片上的YIJI氧化液（Reagent F）

• 室温下，小心将切片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent E）中孵育2分钟

• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）

• 小心加上xx微升YIJI去色液（Reagent G），铺满整个样品表面

• 室温下，孵育1至2分钟，或直至无色

• 小心移去切片上的YIJI去色液（Reagent G）

• 室温下，小心将切片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent E）中孵育2分钟

• 小心移去切片上的YIJI清理液（Reagent E）

• （选择步骤）复染（注意：建议使用YIJI通用型苏木素伊红染色试剂盒-YIJI10030）

• 透明处理

• 放上盖玻片或封片

• 即刻在一般光学显微镜下观察：

注意事项

• 本产品为50次操作

• 操作时，须戴手套

• 脱蜡试剂可以重复使用

• 试剂具有腐蚀性，注意操作安全

• 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

• YIJI氧化液（Reagent F）孵育时间5分钟至2小时不等，皮肤组织为5分钟，眼睛组织为2小时

• 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

• 本公司提供系列组织生物化学成分染色分析试剂产品