Western Blot操作步骤多，每一步的失误都会造成全盘失败，综合而言，抗体仍然是决定成败的关键，如果抗体不好，就是神仙也没招。其中内参抗体很重要，因为内参抗体的选择关系到全盘实验的考评。Actin，Tubulin，GAPDH我们都用过，Actin，Tubulin的缺点是有时候会出现复带，比较稳定的还是GAPDH。如果用心看看cell，nature，science上的文章，大多用GAPDH做内参。进口的，国内分装的，国产的，我们都用过，效果都还可以。
从western实验我们总结出，实验上根本省不下来钱，一个环节的烂货就会导致全盘失败。对于实验设计而言，也是如此，一个步骤的疏忽会导致整个实验立题和评估的逻辑混乱。如果要追求性价比，也就是如何发挥穷人的劳斯莱斯的最大收益，那从一开始就要按秋后算账的原则选择试剂，要算总账；如果要让实验顺顺利利，那就得注意每一个环节，步步为营，细节决定成败。
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