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抗体常见问题

2020.6.01
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

ABGENT抗体是通过什么动物来制备的?我们的单克隆抗体大多是通过BALB/c小鼠制备的,多克隆抗体大多是通过新西兰兔制备的。客户抗体定制服务也主要是使用这两种动物

Western Blot检测中你们是如何区分特异性目标条带的?

多克隆抗体的Western Blot检测结果通常会出现多条带,我们通过对免疫后血清和免疫前血清的检测结果进行比较:在抗体和免疫后血清中都出现而免疫前血清中未出现,且符合预测分子量的条带,就可以认为是特异性的目标条带。

为什么我买的抗体Western Blot检测没有阳性结果?

在ABGENT的Western Blot实验流程中有一些细节是避免背景深和没有结果的关键。

① 不要过度清洗膜,膜的清洗使用含有0.1% Tween-20的TBS,3次,每次5分钟即可。过度的清洗可能会把一抗洗掉。合适的清洗条件能够很好的消除背景并得到最好的结果。

② 不要过长时间的封闭。过度的封闭会导致信号减弱。

③ 请确认您所要检测的抗原是否是产品说明书上所列举的抗原种属。

怎样才能保证Western Blot实验的可重复性?

造成Wester Blot实验重复性差的因素很多,可以从以下几个方面考虑:

① 抗体的保存条件是否严格;

② 抗体稀释后工作浓度很低不能反复使用;

③ 检测样品是否含有目标蛋白?细胞裂解液中的目标蛋白含量会因细胞数


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