酵母菌的鉴定（三）

四、酵母菌生长曲线的测定试验 

1、将培养24小时左右的酵母斜面菌种，用无菌水洗下菌苔，以3000转/分的速率离心，得菌体。将酵母菌体沉淀物再用无菌水洗2-3次后，制备酵母菌悬液（细胞数量约106左右/毫升），测数备用。

2、取上述菌悬液1毫升于盛有清亮的酵母增殖培养液的试管中，<25℃>下培养，以此为起始时间，记录起始溶液的细胞数。并在培养1，2，4，6，8，9，10，11，12，14，16，20，22，24小时时分别取样检测酵母菌细胞数量。

3、酵母菌细胞数量的检测

方法①：活菌计数法。此法是将以上定时取出的被检样品作一系列稀释后，取一定量体积（在0.1-1毫升之间）的稀释液涂布于盛有固体培养基的培养皿内，在<25℃>下培养24小时左右，计算培养皿内菌落数就可测出溶液中活菌数量。

方法②：血球计数板计数法。此法是先将以上定时取出的被检样品作一系列稀释后，使菌落数约为105-106个/毫升，取一滴稀释液滴于血球计数板内，在显微镜下直接计算细胞总数。

4、绘制生长曲线

 以酵母菌细胞数的对数作为纵坐标，以培养时间作为横坐标，画出酵母菌的生长曲线。并分析酵母菌群体的生长规律。

附表1 酵母菌分属鉴定结果

附表2酵母种的鉴定结果记录