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WHITE PAPER: Virotherapy Process Optimization(二)

2020.6.08
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

Figure 3. Virus Counter 3100 (top) and Autosampler (bottom)


Proof of Principle

病毒计数仪已经被广泛应用于多种病毒的计数,包括基因传递载体和溶瘤功能的病毒。这里我们列出一些检测的数据,证实病毒计数仪快速的病毒定量在病毒疗法领域的实用性。
病毒计数仪的精度通过检测系列稀释的病毒样品数据斜率和线性关系来测量。这个值越接近1,说明这个机器产生的数据越可信,越能反映病毒浓度的真实性。

Figure 4证实了这个实验,在这个案例中检测的是水痘病毒。3个不同的样品分别检测了11稀释度,斜率分别为-1.0845,-1.0846,-1.14,R2分别是0.995, 0.997 and 0.996,显示出良好的精确性。
Figure 4. Quantification of serial dilutions of Vaccinia virus usingthe Virus Counter.

在下一个例子中,一个客户想跟踪HeLa细胞培养的麻疹病毒的浓度。他们采用病毒计数仪测量总的病毒颗粒,用TCID50(这个方法需要5-7天的时间)测量病毒的感染性,并比较了两者之间的关系(Figure5)。与大部分的病毒类似,有感染能力的麻疹病毒的数量只是总的病毒群体中的一小部分,在这个例子中只有0.6% to 1.7%,暗示了此批次培养的病毒大部分是非感染性的病毒。有趣的是,在病毒感染后,细胞培养了120多个小时后,感染性病毒数量明显下降,而病毒总量却保持稳定不变,暗示病毒的感染效力会受到培养时间延长的不利影响。

Figure 5. Comparison of total particle count (Virus Counter) andinfectivity (TCID50) of Measels virus grown in HeLa cells.


此外,利用病毒计数仪跟踪定量麻疹病毒在纯化的每个步骤中病毒颗粒的浓度(Figure 6)该实验阐明了病毒的实时定量在病毒纯化优化,避免错误发生的重要性。没有病毒计数仪的实时监测,任何人在生产病毒疗法的药剂时都是在黑暗中摸索,冒着百万美元损失以及需要安全有效产品进行治疗的病人的健康风险。

Figure 6. Tracking virus particle counts during harvest and purification.

About ViroCyt

ViroCyt, LLC was created with the goal of bringing game-changingsolutions to the Life Science industry. Our primary focus is replacingoutdated technologies that slow down the pace of virus-related researchand product development. Additional information can be found athttp://www.virocyt.com.


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