利用Prep 150 LC系统分离紫锥菊提取物中的天然产物（一）

利用Prep 150 LC系统分离紫锥菊提取物中的天然产物

Jo-Ann M. Jablonski, Andrew J. Aubin 和 Wendy Harrop
沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)

简介

紫锥菊(又名紫松果菊)属菊科草本开花植物，是一种能够抵御干燥气候的多年生植物^1,2。紫锥菊花所含的其中一种主要化合物为菊苣酸，它是苯丙素和咖啡酸的衍生物^3,4。最近一份有关菊苣酸的文献检索显示，与此化合物相关的已发表研究文献中，超过50%的内容都与其医疗用途相关，包括上呼吸道感染与癌症的治疗，以及提高对不同刺激物的免疫应答等等^5,6,7。包括地点、生长条件和样品处理在内的诸多因素，都会影响到不同自然产物提取物中菊苣酸的含量。如要分离出足够量的目标化合物以便有效进行其他实验研究，通常需要执行多次粗混合物进样。在本研究中，我们将重点讨论能否将Prep150 LC系统用作从紫锥菊提取物中分离菊苣酸的工具。Prep150 LC系统由ChromScope软件进行控制，这是一款直观型软件，可帮助用户快速实现化合物的分离。本文概述的原理同样也适用于带有紫外发色团的任意化合物的分离。

样品描述

将总计5.3 g的紫锥菊粉末有机根(StarWest Botanicals，Sacramento，CA 95838)分别加入两个50 mL的离心管内(各含2.66 g与2.64 g紫锥菊粉末)，使用20 mL 70:30的甲醇/水溶液震荡约3 h进行提取。然后对离心管执行离心操作，取上清液，使用多个13 mmGHP Acrodisk注射器过滤器进行过滤。浓缩蒸发去除提取物中的甲醇，直至形成黄褐色胶状物。将此胶状物溶于14 mL 95:5的水/乙腈溶液中。

液相色谱条件

结果与讨论

虽然紫锥菊提取物中含有至少四种咖啡酸衍生物，但菊苣酸仍是其中含量最高的一种化合物，菊苣酸在草药产品中的效用主要源于其免疫增强功能⁸。在蒸干甲醇前，紫锥菊粗提取物的分析色谱图表明菊苣酸是其中含量最高的化合物(图1A)。使用快速筛选梯度时，粗提取物中的菊苣酸与相邻谱峰之间能够实现良好的分离。为进一步提高谱峰的分离度，实验重点对梯度进行了研究⁹，并在分析柱上进行了载样量研究。如图1B所示，分析柱可接受的载样量为35 μL的粗提取物进样体积。