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一文了解PCR技术的原理特点及主要应用

2020.6.15
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chloe

随遇而安

   PCR技术的基本原理类似于DNA天然复制的一个过程,pcr技术的特异性主要是依赖于与靶序列的寡核苷酸引物。PCR技术其实是一种体外的DNA 产生扩增的技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将需要被扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经过一系列反应的多次循环,然后使DNA的片段在数量上可以增加,从而就可以在较短的时间内获得我们所需的特定的基因片段。

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   Pcr技术具有特异性强、灵敏度高、简便快速、纯度要求低等特点。PCR产物的生成量是以指数方式增加的,PCR的灵敏度可达3个RFU;在细菌学中最小检出率为3个细菌。PCR反应用耐高温的聚合酶,一般在2-4 小时就可以完成扩增反应。而且不需要分离病毒或者是细菌及培养细胞等过程,DNA的粗制品以及RNA均可以作为扩增的模板。而且可直接用临床的标本如血液、洗嗽液、毛发、活组织等DNA的扩增检测。

   PCR的最大特点,是可以将微量的DNA进行大幅的增加。所以说,无论是化石中的古生物,亦或是历史人物的残骸,还是几十年前作案的凶手所遗留的毛发、皮肤或者是血液等,但凡是可以分离出一丁点的DNA,那么就能用PCR加以放大,进行比对。

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