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BlotCycler全自动蛋白质印迹杂交系统与手工操作对比

2020.6.15
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

Western Blot 属于经验依赖性的多步骤实验,结果的优劣受到多个因素的影响,传统的手工操作容易引入误差,难以保证重复性。美国Precision Biosystems公司携手环亚生物科技有限公司(APG BIO)推出的BlotCycler全自动化的蛋白质印迹杂交系统可以很好的解决了这些问题。

是全自动化的蛋白质印迹杂交系统Western Blot洗液工作站,自动化完成封闭、孵育、清洗和一抗回收的一系列工作,很好地解放您的劳动力。更为重要和有意义的是:ZL的流体清洗可以减少二抗在膜上的附着,降低背景,提高信噪比和相对灵敏度;自动化的操作流程避免了手工操作的误差,保证了批次内和批次间实验的重复性;高通量操作和多条件的设定可以辅助您优化Western Blot 实验的条件,例如合适的抗体浓度。

自动化操作,可以获得更好的重复性

自动化的过程相对于手工操作可以把误差降至最低,保证了重复性。

如上图所示,使用BlotCycler 平行处理5 张膜,检测Tubulin 和IL-2蛋白,条带信号使用分子量标准进行均一化处理,

目的条带的相对信号值在5 次实验中的偏差较小。由此可见,BlotCycler 的自动化操作能够保证较好的重复性。

ZL的流体技术降低背景,提高信噪比和相对灵敏度。

通过一系列对比实验发现,使用BlotCyclerTM 进行Western Blot 可以获得更低的背景值,目的蛋白质条带更加清晰锐利。

 


如上图所示,泳道1、2、3 分别上样Hela 细胞的裂解液、重组的人IL-2 蛋白和前两者的混合物,加入小鼠源Tubulin和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 标记的抗鼠二抗和DyLight649 标记的抗兔二抗。
设立4 组平行实验:BlotCyclerTM 4℃环境操作,手工4℃环境操作,BlotCyclerTM 室温环境操作,手工室温环境操作, 膜信号检测使用相应的荧光成像设备。不同组内蛋白条带的信号通过分子量标准品进行均一化处理。

结果发现,使用BlotCyclerTM 操作所获得的IL-2 和Tubulin 的相对信号值均高于手工操作,不论是4℃还是室温环境。

由此可见,BlotCyclerTM 的自动化操作确实能够降低背景值,提高信噪比和相对灵敏度。

通过以上对比我们可以看出,BlotCycler全自动化的蛋白质印迹杂交系统可以很好的避免手工所引起的误差,降低背景,提高信噪比和相对灵敏度,对从事Western Blot实验的科研工作者来说是个不错的选择。


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