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二手烟对细胞暴露及其对呼吸道病毒感染的易感性研究 2

2020.6.16
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

 

香烟烟雾暴露对calu3病毒感染细胞的影响

可以观察到,在MOI 1 PFU/cell的3个独立感染实验3天后,总的传染性病毒产量没有大的变化。然而,在烟雾暴露和感染Ad3p细胞中,传染病毒产量有明显的增加趋势。

当对顶层、细胞内以及底部的感染病毒产量进行评估时,发现在底部没有检测到病毒。有趣的是,在主流烟和测流烟感染Ad4和Ad5后的顶层和细胞内病毒滴度有明显的增加。在MOI  1.0 PFU/cell感染三天后的感染病毒的产量评估。

 

香烟烟雾暴露导致进入的感染Ad5-CVM-mCherry增加

 

在MOT为10.0 PFU/cell,感染了非复制型Ad5-CMV-mCherry的Calu3细胞的mCherry荧光蛋白的表达量的荧光显微镜的检查。过滤测流烟空气的暴露实验作为对比控制,10X倍数观测。初步数据显示,侧流烟雾暴露导致进入的感染病毒量增加。重复实验并通过流式细胞术对细胞表达的mCherry的数量进行定量评估。

  

促炎细胞因子的反应

 

   在1.0 PFU/cell MOI感染Ad3p,Ad4p和Ad5p6小时和18小时后,暴露于主流烟和测流烟,采用悬浮芯片检测腺病毒感染Calu3细胞促炎细胞因子反应。

 

香烟烟雾暴露对calu3鼻病毒感染细胞的影响

总的来说,目前的实验结果表明,如腺病毒,暴露于主流或侧流烟雾没有显著提高受感染细胞的鼻病毒的复制。在MOI为0.1,0.5,1.0和5.0 PFU/cell的数据集之间没有观察到显著可测量的差异。令人鼓舞的发现是,可以在transwell系统的顶部,细胞和基底室单独感染腺病毒的产量评估,并进行类似的鼻病毒实验,以提高我们的检测差异的能力。

 

总结

目前数据的初步分析表明,极化肺上皮细胞的香烟烟雾暴露(无论是主流烟和侧流)导致可测量的增强腺病毒的复制。此外,这些细胞暴露于吸烟前,腺病毒感染加剧了他们在感染后18小时以上炎症反应,可能是由于增加了病毒进入的结果。

 


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