辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG应用：WB（1:1000 - 1:50000）、ELISA（1:500 - 1:10000） IHC（1:50 - 1:500）。 由于具体实验中检测方法的灵敏度，温度及孵育时间等因素均可影响抗体最适工作浓度，所以实验人员进行特定实验时，需根据具体情况优化最适使用浓度。 反应性：该山羊抗兔二抗与兔IgG分子有特异性反应，与其它兔免疫球蛋白（包括IgM、IgE、IgD、IgA等）的轻链有交叉反应。该二抗与血清内非免疫球蛋白无交叉反应，但可能与其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。
辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG hrp过量导致wb实验过程中的ecl猝灭现象的原理：淬灭是由于显色反应中的hrp酶量过多造成的，推荐的改进方法是，减少hrp的量，包括，减少蛋白的上样量，降低一抗浓度，降低二抗浓度这三个方法，总之就是减少hrp在膜上的结合量。可能有的人会问，我大量的抗体或者蛋白上样量都做不出来，减少反而能做出来，这怎么可能呢？呵呵，其实我们首先要弄清楚，在显色反应中谁是过量的问题，当然是底物，因为，亮度与hrp的量相关，hrp与目的蛋白的量相关，只有底物过量hrp的量才能清楚的反应目的蛋白的量（这里就不考虑定性实验了）。因此，hrp相对于底物必须是不足量的。其次，应该有很多朋友都遇到过这样一个现象：就是曝光时，条带特别亮，可是压上一两次片子，条带就灭了，但是如果把这张膜再用TBST洗过夜，再去曝光，荧光反而能持续更长的时间，这就是由于洗涤，使原先一些结合不牢的二抗掉了下来，曝光时，hrp的量降低了，不会较快的消耗底物，所以，发光的时间就变长了。
最后对标记羊抗兔IgG该如何保存呢？专家建议：保存在-20°C.保质期为收到货物后至少1年，合适的保存方式可以延长保质期。
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