分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

常见的疼痛研究模型及方法(三)

2020.6.22
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

福尔马林致痛模型 

本模型的目的是模拟急性组织损伤所致的持续性疼痛。一般以大鼠为实验对象。在动物一肢足背皮下注射稀释的福尔马林(formalin)溶液,导致动物的行为改变如安静时的屈腿、运动时的跛行以及舔足等。这些行为的程度(如舔足时间)与福尔马林浓度成正比,一般认为它是疼痛的象征。此外,其它行为如理毛、探索和运动活动等也受福尔马林注射的影响。具体做法如下: 

将实验动物随机分为若干组,其中福尔马林组在一肢足背皮下注射稀释的福尔马林溶液50ml,浓度在0.1%~10%之间。对照组动物将注射针刺入同部位注射等体积的生理盐水。注射后,将动物置于观察笼中,在动物不能察觉的前提下记录其在60分钟内对注射侧和对侧后足的舔足时间。每隔5分钟计算一次舔足分数(即总舔足时间)。另外一种评分方法是,按如下的四级评分:0=注射足承担正常重量;1=运动时跛行、休息时足轻触地面;2=注射足抬高,最多用指甲触地;3=出现针对注射足的舔、咬和理毛行为。 

必须注意的是,动物应事先训练10天使之适应实验室的环境及手捉等处理。动物应饲养在恒定的昼夜节律(光照时间)环境中,且观察应当在“暗夜期”在暗红色光线下进行。 

本模型的各种症状普遍分为两个时相:前5分钟为第一相,20~60分钟为第二相。两相均可用于实验,但以第二相为常用。据认为,使用1.5%的福尔马林剂量加上综合的评分方法具有最强的分辨痛程度的能力。 

Clavelou等人新近提出了一种用于面部的福尔马林致痛模型。他们把不同浓度的福尔马林溶液(0.2~10%)皮下注射到大鼠的右上唇,对照动物则注射盐水。注射后,立即把动物放在观察箱中观察45分钟。记录注射后每3分钟时间内动物用同侧前肢或后肢摩擦注射部位的秒数作为痛分数。注射后动物呈现出类似的两相痛敏。结果表明浓度在0.5~2.5%之间的福尔马林溶液最有利于观察疼痛强度的变化情况。 

白陶土-鹿角菜胶炎症模型 

本模型的目的是模拟亚急性炎症所引起的疼痛。白陶土(Kaolin)是一种细颗粒状物质,成分为氧化铝,在此起机械刺激作用;鹿角菜胶(carrageenan)是由水生植物鹿角菜中提取的胶体物质,具有过敏刺激作用。鹿角菜胶单独实验即可诱发炎症,若与白陶土合并使用,则炎症更为强烈。 

可采用家兔或大鼠作为实验对象。今以大鼠为例。关节炎的引发分为两步:首先将动物麻醉(可用戊巴比妥钠或水合氯醛),由一侧后肢足底注入4%白陶土混悬液0.1ml,并按摩5分钟使之在组织中分散。在第一次注射的1小时后,再注入2%鹿角菜胶溶液0.05ml并按摩5分钟。以第一次注射的时间作为致炎开始时间。 

炎症过程一般在第一次注射后2小时内开始。动物后足明显红肿,皮温显著升高,PWT值显著降低,呈现类似痛敏的症状。这些症状一般能持续至第一次注射后12小时以上,24小时后基本复原。因而本模型属于亚急性炎症痛模型范围。本模型亦可采用关节腔注射。 

此模型适合进行急**理实验以及比较炎症发作前后变化的电生理实验。 

慢性病理性疼痛模型 

概述 

临床上持续超过6个月的疼痛即被视为慢性痛。慢性病理性痛的特征是,疼痛持续时间长,一般均涉及机体的系统性病变(如免疫反应异常或神经系统的异常)。其疼痛没有明显的外界刺激作为诱因或疼痛程度与局部的病变之严重性不成比例。在这个意义上,癌症痛不属于慢性痛,因为它具有明确的局部持续刺激,应当属于急性痛的持续状态。 

慢性病理性疼痛模型主要分为两大类型:炎症性及神经源性。 

炎症痛模型 

炎症是疼痛最常见的原因。很多原因不明的疼痛疾患实际上是由于软组织的无菌性炎症所致。因而,在动物模型上研究炎症痛的特征、机制,可能为理解疼痛及寻找有效的镇痛方法提供帮助 

我们介绍3种慢性炎症痛模型,均是以福氏佐剂作为致炎物质的。它们是:多发性佐剂关节炎,单发性佐剂关节周围炎和单发性佐剂关节腔炎模型。 

多发性佐剂关节炎模型 

本模型系采用每毫升含干重为1毫克结核杆菌的高浓度福氏佐剂,向大鼠尾根部或足底作皮内注射。溶剂采用4份石蜡油、4份生理盐水和1份乳化剂(Falba或Aracel A)混和而成。注射后77~90%的大鼠会出现一定的持续时间不等的关节炎症。动物的一侧或双侧后肢通常首先出现改变,出现多个关节的红肿;其次是前肢和尾部出现关节炎症。根据动物受累及的关节数目及其行为表现,可以对此炎症的严重程度予以评价。多数动物在第18~25天内病情最为严重。 

福氏佐剂是一种免疫佐剂,可以加强机体对抗原产生免疫的能力。本模型所诱导的是动物的免疫反应性炎症,其目的是模拟某些自身免疫性疾病如风湿性关节炎。多发性佐剂关节炎是最早提出的关节炎模型之一。利用此模型曾经做了大量工作。这一模型适合于进行抗类风湿的药物研究和自身免疫性疾病的研究。用于作为疼痛模型时,其缺点是病变范围过于广泛,除了多个关节均有炎症反应以外,往往伴随有机体多个器官系统(包括中枢神经系统)的免疫性病变。这一情况限制了它在疼痛研究特别是疼痛的中枢神经机制研究中的广泛应用。

互联网
仪器推荐
文章推荐