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小鼠 HYD ELISA检测试剂盒使用说明

2020.6.29
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

试验原理:

HYD试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HYD浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将HYD和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HYD的浓度呈比例关系。

内容及其配制:

试剂盒成份 96孔配置 48孔配置

96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T)

塑料膜板盖 1块 半块

标准品:240ng/ml 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)

空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml)

标准品稀释缓冲液 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)

生物素标记的抗HYD抗体 1瓶(8.0ml) 1瓶(4.0ml)

亲和链酶素-HRP 1瓶(12ml) 1瓶(5ml)

洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml)

底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)

底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)

终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml)

自备材料:

  1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

样品收集、处理及保存方法:

1、 血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红

细胞迅速小心地分离。

2、 血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。

5、 保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作注意事项:

● 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

● 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

● 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

● 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

安全性:

  1. 避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。


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