八、问题与解答
问题 | 原因 | 解决 | 注释 |
无CD69胞内染色 | 细胞未激活 | 激活剂制备不当，见激活剂制备储存一节。 | PMA Ionomycin激活4小时后CD3 T淋巴细胞CD69阳性率应>90% |
使用了错误的抗凝剂 | 应使用肝素钠，不要使用肝素锂，避免使用ACD与EDTA等络合钙的抗凝剂。 | 淋巴细胞激活需要Ca，络合Ca的抗凝剂会影响激活。 | |
细胞未通透 | 在使用通透液前先使用溶血素 | 溶血素辅助细胞通透 | |
BFA失活或制备不当 | 详见BFA制备BFA于-20℃储存 | 详见BFA制备 | |
胞内染色阳性但很弱 | 抗细胞因子抗体浓度不对 | 按R&D推荐量使用荧光抗体 | 正常的激活T |
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