1、应用范围
此ELISA试剂盒可用于人尿液中5-HIAA的体外定量检测。
2、前言
原发性类癌瘤通常都源自中肠的肠嗜铬细胞，并且大多情况都位于回肠末端中。类癌瘤通常都会分泌各种各样的吲哚，此类肿瘤的一般都明显的表现为尿液5-HIAA（五羟色胺的最终代谢产物）的分泌量升高。5-HIAA传统的检测方法是通过亚硝基萘酚的重氮化作用产生紫色。然而，人们已证明很多存在于尿液中的其它物质会干扰此反应而出现假阳性结果。人们也尝试着通过将离子交换层析和荧光分析相结合的方法来克服此问题。但这些方法灵敏度低并且耗费时间。最近，有人也介绍使用下列方法来检测5-HIAA：紫外区域5-HIAA的高效液相层析与荧光分析（或电化学分析）相结合的方法。因为尿液中存在着各种各样的干扰复合物，所以这两种方法都要求进行溶剂提取。而5-HIAA的酶联免疫检测是用于尿液中类肿瘤综合征标记物定量检测的一种全新的、简单的方法。
3、实验原理
此ELISA试剂盒利用的是竞争法原理，生物素标记抗原和未用生物素标记抗原竞争结合一定量的抗体结合位点。结合到抗体上生物素标记抗原的量与样品中被分析物的浓度成反比。反应系统达到平衡后，未结合的生物素标记的抗原用洗涤液洗去。结合了生物素标记抗原的抗体的量的测定是以抗生物素碱性磷酸酶作为标记物，以PNPP(对硝基苯酚磷酸盐)作为底物液。将未知物的酶反应活性和已知标准品的反应曲线相比较，可以得到未知物的量。
4、试剂盒成分
数量 | 标志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，单克隆）。 |
1×5ml | ANTISERUM | 5-HIAA 抗血清 蓝色，即用，内含：抗血清（兔），磷酸缓冲液，稳定剂。 |
1×5ml | BIOTIN | 5-HIAA 生物素 即用，蓝色，内含：磷酸缓冲液，稳定剂。 |
1×0.2mL | ENZCONJ CONC | 酶联物 浓缩型（100×） 内含：碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体（羊），Tris缓冲液，稳定剂 |
1×7×0.5ml | CAL A-G | 标准品A-G 0; 0.4; 1.0; 2.75; 7.5; 20; 55 mg/L 0; 2.1; 5.25; 14.4; 39.4; 105; 288 μmol/L 即用,内含:5-HIAA（甲基化）,稳定剂。 |
1×2×0.5ml | CONTROL 1+2 LYO | 质控品1+2，冻干粉，内含：人尿液（正常与非正常人的尿液），具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签. |
1×2ml | METHYLRAGE | 甲基化试剂，黄色，即用，内含二氯甲烷 |
1 x 1 mL | HCL | HCl，即用，0.1M的HCl |
1 x50ml | ASSAUBUF CONC | 检测缓冲液，浓缩（10 x） 内含：磷酸缓冲液，BSA，稳定剂 |
1 x4ml | DILREAG | 稀释液，即用，内含：N,N-二甲基甲酰氨 |
1 x50ml | WAHSBUF CONC | 洗涤液，浓缩（20 x） 内含：磷酸缓冲液，吐温，稳定剂 |
1×9 | PNPP SUBS | PNPP底物片，内含：对硝基苯磷酸（PNPP） |
1×27ml | PNPP BUF | PNPP底物缓冲液，即用，内含：二乙醇胺，水， |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP终止液，即用，内含：1M的NaOH，0.25M的EDTA |
3× | FOIL | 粘性金属板 |
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