质谱条件
质谱系统： 沃特世ACQUITY® TQD
软件： 沃特世MassLynxTM 4.1
三聚氰胺
离子化模式： ESI+
毛细管电压： 3.50 kV
三聚氰酸
离子化模式： ESI-
毛细管电压： 3.00 kV
源温度： 150℃
脱溶剂气温度： 400℃
锥孔气流速： 50 L/小时
脱溶剂气流速： 900 L/小时
碰撞气流速： 0.15 mL／分钟
包括同位素内标在内，每个化合物有2个离子通道。第二个通道用于确认，峰面积的比例必须与实际标准品的相匹配才能被认定结果呈阳性。
结果和讨论
三聚氰胺和三聚氰酸的校准曲线通过目标化合物和同位素内标的响应比相对于目标化合物浓度而生成。三聚氰胺（0.25
- 40.0ng/mL）和三聚氰酸（0.50
-80.0ng/mL）的校准曲线均呈线性，仪器得到的相关系数（R2）均大于0.99。三聚氰胺和三聚氰酸的校准残差均低于10%。典型的校准曲线和残差图如图2所示
该方法的精准性是通过在方法定量限浓度上对代表性样品和配料加标进行评估。成品加标量为0.083μg/g三聚氰胺和0.568μg/g三聚氰酸。原料加标量为0.416μg/g三聚氰胺和1.26μg/g三聚氰酸。三聚氰胺和三聚氰酸的回收率均介于90 - 110%之间，四天内由多位分析员用两台仪器得出的八次独立测定结果的相对标准偏差的平均值几乎都< 10%。结果汇总于表1。
方法检出限（MDL）和方法定量限（MQL）根据40CFR第136部分附录B所述的方法进行确定。检出限根据所测定浓度的标准差计算得出，定量限被定义为检出限的三倍。在8天内用两台仪器分别对加标样品进行分析后，三聚氰胺和三聚氰酸的方法定量限分别被确定为0.039μg/g和0.105μg/g。由于原料分析需要进行稀释，因此检出限大约高出10倍。
串联质谱可在选择反应监测（或多反应监测）模式下进行选择性检测。在这种运行模式下，仅可检出特定母离子/子离子对的化合物。如图3所示，三聚氰胺的产物离子光谱包含两个子离子。
在三聚氰胺分析中同时监测两个MS/MS通道而使得方法专一性增强。如果在127→85和127→68
MRM色谱图中存在相同色谱峰，并且该峰的响应比必须在所得到的标准品响应比的20%以内，那么可以鉴定出三聚氰胺阳性的结果。标准品（0.25ng/mL三聚氰胺和2.0ng/mL三聚氰酸）、一种非强化型婴儿配方奶粉和一种强化型婴儿配方奶粉（0.083μg/g三聚氰胺和0.568μg/g三聚氰酸）的典
型色谱图如图4所示。
使用同位素内标可大大增强该方法的定量能力和耐用性。通过这种简单稀释和进样程序，每天仅使用ACQUITY
TQD即可对100多份样品是否存在三聚氰胺和三聚氰酸进行检测。经证实，该方法适合分析95%以上的婴儿配方奶粉、营养品和蛋白粉样品。在其他情况下，或者对有共流出干扰的复杂基质，应采用一个包括阳离子或阴离子交换SPE的固相萃取（SPE）步骤。
结论
现已开发出一种用于同时测定液体和粉末状婴儿配方奶以及成人营养品中三聚氰胺和三聚氰酸的快速而耐用的方法，并根据40
CFR第136部分进行了验证。成品中三聚氰胺的检出限和定量限分别为0.013μg/g和0.039μg/g，三聚氰酸相应为0.035μg/g和0.105μg/g。对于加标样品（n=48、8天、两台仪器）而言，三聚氰胺（0.083μg/g）的平均回收率和精确度为100.9%，相对标准差6.8%；三聚氰酸（0.568μg/g）为99.1%，相对标准差10.4%。
简单稀释后，配备TQ检测器的ACQUITY
UPLC系统可同时对三聚氰胺和三聚氰酸进行快速分析（不到6分钟）。UPLC®与串联质谱检测相结合提供了卓越的灵敏度和每天分析超过100份样品的高通量。同位素内标的加入在较宽的浓度范围内和各种产品类型中提供了良好的线性和定量效果，从而使三聚氰胺和三聚氰酸的鉴定和定量结果可信。
所述方法具有快速筛查包括婴儿配方奶粉的蛋白原料、奶源和营养品的能力，从而可确保生产商和监管机构能保证产品的安全性和完整性。
参考文献
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12月；24（12）: 1319-1325。
[2] M Benvenuti、A O'Connor，利用UPLC/MS/MS和UPLC/ PDA
分析三聚氰胺、三聚氰酸二酰胺和三聚氰酸，沃特
世应用笔记（编号720002300en），2007年。
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异性分析婴儿配方奶粉中的三聚氰胺和三聚氰酸，
沃特世应用笔记（编号720002865en），2008年。
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