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DyLight荧光二抗——美国Abbkine高性价比的全新荧光体验 一

2020.7.13
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

美国Abbkine的DyLight™系列荧 光标记是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性)、对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势,越来越受到科研客户的喜爱。DyLight™种类齐全,如Dylight 405是蓝色荧光,替代Alexa 405;DyLight 549是绿色荧光,可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488;完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)则是更强的红色荧光;另外,Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我们来看看美国Abbkine品牌DyLight系列荧光的优异表现吧:

 

一、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更高的荧光发光强度


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dylight-549-cy3-alexa-555.gif

 DyLight 488标记的抗体比Cy2 和FITC标记的更亮,与Alexa Fluor 488 标记的亮度相当。DyLight 549标记的抗体比传统的罗丹明、TRITC等荧光亮,与Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相当;而DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。相比较Texas Red而言,不仅更亮,而且具有更好的水溶性。

 

二、DyLight荧光二抗比传统荧光及Alexa标记二抗具有更低的背景!

 

 


dylight-488-alexa-fitc1.jpgdylight-649-flow.gif

左上图为使用 FACSCalibur流式细胞仪(Becton Dickinson),分析抗-CD3和其他荧光素标记的人外周血淋巴细胞图谱。不同颜色分别指示DyLight 488 (绿色)、FITC (黄色)、Cy2 (蓝色)以及Alexa Fluor 488(红色)标记的荧光二抗。箭头所指处显示Alexa Fluor 488在这个实验中有轻微的背景。右上图为在流式分析中,以抗-CD3和各种荧光素连接二抗标记的人外周血淋巴细胞图谱。绿色为DyLight 649、黄色为APC、蓝色为Cy5 标记的二抗。Alexa Fluor 647为红色区域。箭头所指处显示Alexa Fluor 647在这个实验中有轻微的背景。

 

三、DyLight荧光二抗比传统荧光标记二抗具有更好的光学稳定性、发光更持久、更适合拍照


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从光稳定性上来说,DyLight 488与Alexa 488均表现优异,均强于FITC和Cy2;DyLight 549与Alexa 555具有相当的耐光性,稍微比Cy3强。在封片剂中加入抗淬灭剂如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加这三种荧光染料的耐光性;在可见光谱的橙-红区域内,DyLight 549和Cy3标记的二抗在所有免疫荧光实验中表现出最大灵敏度。DyLight 594在不含有抗淬灭剂的条件下,远较Texas Red稳定,与Alexa594相当;在含有某些抗淬灭剂的情况下,DyLight 594同样表现优异。

 

四、DyLight荧光二抗种类更多更全

dylight-list.jpg从蓝色的DyLight 405、绿色的DyLight 488、黄色的DyLight 549、橙色的DyLight 594到红色的DyLight 633和DyLight 649等最常用的荧光颜色,激发光和发射光光谱分布合理,适用于各种荧光分析。其中蓝色荧光的DyLight 405适合用于绿色和红色以外的三标实验。

另外,还有两种远红外DyLight标记抗体,具有更低的荧光背景干扰和更强的样本穿透力,因而更适用于细胞或组织的成像等领域的研究。艾美捷提供的进口DyLight抗体产品覆盖各种动物种属,包括人、小鼠、兔、大鼠等,另有3种标记的链亲和素。




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