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PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释,再加一点TritonX100效果好。
培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了,用培养液没什么意义,只要保证其pH等条件适合就好了。
抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下,有很多protocol。一般一比几百到一万都有,依抗体而定。可以4度过夜,这样染色效果好。二抗一般较便宜,一般1:50到1:200多。