设备:日立CS150GXL超速离心机
S55A 固定角式转头
10PC厚壁管(不加盖实际容量7.3ml,最高转速55,000rpm)
样品:HBV阳性血,低速离心后,含HBV血浆
梯度:10pc管 底部:含HBV血浆+KBr 配成ρ=1.32,(约36%w/w),4ml
中部:32.3%(w/w),KBr ρ=1.28, 1ml
上部:1M Nacl ρ=1.06, 2ml
离心参数:50,000rpm(215,000xg),20℃,加速“5”,减速“5”,8小时
离心后:Ⅰ. HBV 带在中部稍偏上
Ⅱ. 终密度:近离心管表面 ρ=1.12
近离心管底部 ρ=1.29—1.30
全管ρ分布为凸指数曲线
Ⅲ. O.D.280: 近表面为25,在HBV带附近突升至130,近管底约140
Ⅳ. RPHA:离心前底部4ml为300,离心后HBV界面处≥4000,有小平台
结果点评:比较简单的阶梯梯度,很好的分离效果.
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