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常用抗体的应用范围及选用(二)

2020.7.27
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

2.单克隆小鼠抗人上皮细胞膜抗原 (Monoclonal mose anti human epithelial memberance antigen,EMA)
上皮细胞膜抗原是上皮细胞表面大分子糖蛋白物质,它不仅存在于各种上皮,以及各种上皮来源的肿瘤,也可存在于部分非上皮及其来源的肿瘤,如浆细胞,组织细胞等。
应用EMA来检测正常的组织时,其阳性表达主要在细胞膜上,但在检测肿瘤时,这种阳性物不仅在细胞膜上出现,也可在细胞浆中见到。实验中发现,肿瘤细胞在分化增生时,阳性物表达强阳性。当肿瘤细胞趋于成熟或已成熟时,阳性物表达较弱,肿瘤细胞未分化时,抗原表达呈阴性。
EMA在检测上皮组织及其来源的肿瘤组织时,抗原表达阳性,在检测非上皮来源的肿瘤如浆细胞瘤,滑膜内瘤,上皮样内瘤,平滑肌内瘤,神经鞘瘤,及来恶性神经鞘瘤时,抗原也可表达为部分阳性。因此认为:EMA不是上皮性来源肿瘤所特有的标记物,它的特异性不高。
该 抗体适用范围广,适合于各种类型的切片,应用真空负压LSAB法检测时,稀释度在1:100。
3.癌胚抗原(Carcinombryonic antigen ,CEA)
自1965年Gotel等从结肠癌分离出一种肿瘤的相关抗原后,经过进一步的研究后发现,它存在于胎儿的肠里,由于人们将其称为癌胚抗原。在实际应用中,CEA是一种广谱的标记物。经实验证明,它对胃癌,肠癌,肺癌,乳腺癌,胰腺癌,子宫颈癌,子宫体腺癌,卵巢癌,皮肤鳞状细胞癌,膀胱移行上皮癌,食道癌等,抗原表达阳性,在上述的同类组织及癌旁类性组织,也可见到阳性物,有文献报导,用CEA标记滑膜内瘤,间皮瘤,上皮样内瘤和脑膜瘤,也可表达阳性。
目前,CEA有两种产品,一是单克隆抗体,另一是多克隆抗体。
①单克隆小鼠抗 人CEA,克隆为A5B7。
该抗体的特点,纯度高,杂质含量少,很少引起非特异性染色,同时,也不与含糖蛋白的物质起反应,因此,背景清晰干净。
该抗体可检测上述的病种及其来源的组织,适用于各种切片的染色。稀释度为1:100。
②兔抗人CEA。该抗体为多克隆抗体,纯度不如①号抗体,检测及适应与①号抗体相同,但效果不如①号抗体,且较容易产生背景。稀释度在1:300。
4.山羊抗人甲胎蛋白(Goat anti human alphafeloprotein,AFP)
AFP主要由胎儿肝细胞和卵黄细胞产生的一种酸性糖蛋白少量由胎儿的胸腺、肺、胃、肠道的细胞产生。AFP也不是一种肝癌特有的标记物。初用时把AFP作为原发性肝癌的一项特异性诊断指标。随着免疫组化的深入开展和研究的深入进行,实验结果证明:AFP的升高不仅在原发性肝细胞癌的病例,在生殖细胞肿瘤卵黄瘤和睾丸胚胎癌的病例也可大量见到。
用AFP检测后显示阳性的病例有:原发性肝细胞癌,胃癌,卵黄 瘤和睾丸胚胎癌等。其阳性 表达部位主要在细胞浆,也有少量在细胞膜和细胞核上。
该抗体适合于各种切片的标记,可用任何一种 免疫 方法来进行染色,稀释度为1:100-1:300。
上述四种类型的抗体可作为来源于上皮的肿瘤及其它来源的肿瘤的区别。只要损伤正确,抗体的质量没问题,就可获得满意的结果。使用时应根据不同的组织,不同的形态结构,来选择合适的抗体。当然有的肿瘤决不是用一两种抗体就能够把它们给予区分开来。因此,要根据不同的情况合理使用抗体,以便作出正确的诊断。
(二)常用的间叶源性组织及其肿瘤的检测抗体
间叶源性组织范围广,内容多,它包括肌肉,纤维结缔组织,脂肪,血管,周围神经,骨,软骨,淋巴等组织。由于这方面涉及的东西较多且较复杂,因而在上述方面所发生的肿瘤,是肿瘤病理学中最棘手和最疑难的问题之一。随着免疫组化技术在肿瘤鉴别诊断中的应用,已经克服了许多以往无法克服或者难以克服的问题。当前,应用于这方面检测的抗体越来越多,下面将介绍几种常用的抗体:
1.波形蛋白(Vimentin ,Vim)
Vim是原始的中间丝,它存在于所有的间叶组织细胞中,可以向神经胶质,肌源性细胞和上皮细胞中间丝演变。Vim是一种单克隆抗体,临床应用来作鉴别诊断的有:鉴别癌与内癌,前者阴性,后者阳性;鉴别小细胞性肿瘤,这时应多用几种抗体,如CK,LCA和Vim,如为淋巴瘤,尤文氏瘤或神经母细胞瘤,Vim为阳性;鉴别黑色素瘤和低分化癌时,Vim阳性。
应用Vim检测肿瘤阳性的有:HDR-S细胞,B免疫母细胞形淋巴瘤,浆细胞瘤,T 免疫母细胞及多形性T 淋巴瘤,平滑肌瘤和肉瘤,纤维瘤和肉瘤,脂肪瘤和肉瘤,横纹肌肉瘤,血管瘤,粘液瘤,神经纤维瘤,鞘瘤,恶性神经鞘瘤,恶性纤维组织细胞瘤,纤维组织细胞瘤,恶性巨细胞瘤,间叶肉瘤,骨瘤和骨肉瘤,骨巨细胞瘤,软骨细胞瘤,骨软骨瘤,软骨母细胞瘤,软骨肉瘤,滑膜肉瘤,精原细胞瘤,黑色素瘤和恶性黑色素瘤,脊索瘤癌肉瘤,尤文 氏瘤,脑膜瘤,卵泡膜细胞瘤,颗颗细胞瘤,间皮瘤,等等。
在正常组织中,Vim标记阳性组织的有:
平滑肌和横纹胶肌细胞,肺泡吞噬细胞,血管及内皮细胞,肝脏枯否氏细胞,滑膜细胞,浆细胞,奇形细胞,室管膜细胞,卵巢颗粒细胞,黑色素细胞等。
Vim是目前用来鉴别上皮性肿瘤还是间叶源性铁常用抗体之一,不过,在应用于鉴别肿瘤时,应多选用几种抗体。
Vim的抗体现市售的有几种:
⑴单克隆小鼠抗Vim克隆3B4,该抗体稀释度较高,可在1:200,它适用于各种切片,但在使用前必须抗原修复。
⑵克隆小鼠抗猪Vim,克隆V9,该抗体较早前使用,从已检测的大量病例情况分析,该抗体效果不错。但该抗体最大的缺点是稀释度较不理想,仅在1:10左右,由于稀释度不大,标记的例数较少,成本较高,现已较少使用。
⒉Von Willebrand因子。
这种抗体在旧叫法中被称为第Ⅷ因子相关抗原,如今被 称为Von Willebrand因子,它可在各种内皮细胞和巨核细胞的胞浆中找到,因此在临床的应用中,它常被用来检测由内皮细胞来源的各种肿瘤,同时也用来检测骨髓标本中巨核细胞的增殖。该抗体使用前须做抗原修复。注意抗体有单抗 及多抗之分。
⒊CD34
该抗体被认为是一种稳定的,可靠的血管内皮细胞及其来源的肿瘤的标记物。它对毛细血管,小血管内皮细胞显示强阳性,对中至大血管内皮细胞量选择性阳性,对软组织肿瘤,肿瘤 毛细血管,血管管和血管肉瘤的内皮细胞呈阳性,对淋巴管内皮阴性。使用时须做 抗原修复。
⒋CD31
该抗体与CD34的标记范围基本一样。

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