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特异性酯酶:氯乙酸 AS-D萘酚酯酶(NCE)染色实验

2020.8.10
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理 细胞内酯酶水解合成的底物萘酚酯(一种萘的衍生物)而释放出萘酚,并迅速与重氮盐偶联结果在酶活性部位有明亮色彩的沉淀物出现.

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液六偶氮化新品红苏木素氨水洗液

实验步骤

一、实验试剂:


(一)底物混合液


(1)0.067mol/L  磷酸盐缓冲液(PH7.6)


(2)六偶氮化新品红(hexoliaed  new   fuchsin)溶液(新鲜配制)


①溶解新品红(new  fuchisn)1g于2mol/L盐酸液25ml中,溶液可长期保存。


②40g/L亚硝酸钠溶液,4℃保存,每周必须新鲜配制,使用前将等体积新品红溶液和40g/L亚硝酸钠溶液混合,反应1min此液好为六偶氮化新品红


③氯乙酸萘酚AS-D液:取氯乙酸萘酚AS-D(naphthol AS-D hcloroacetate)5mg溶于N,N-二甲基酰胺N,N-dimeth for mamide)2.5ml中。


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