实验方法原理 细胞内酯酶水解合成的底物萘酚酯(一种萘的衍生物)而释放出萘酚,并迅速与重氮盐偶联结果在酶活性部位有明亮色彩的沉淀物出现.
试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液六偶氮化新品红苏木素氨水洗液
实验步骤
一、实验试剂:
(一)底物混合液
(1)0.067mol/L 磷酸盐缓冲液(PH7.6)
(2)六偶氮化新品红(hexoliaed new fuchsin)溶液(新鲜配制)
①溶解新品红(new fuchisn)1g于2mol/L盐酸液25ml中,溶液可长期保存。
②40g/L亚硝酸钠溶液,4℃保存,每周必须新鲜配制,使用前将等体积新品红溶液和40g/L亚硝酸钠溶液混合,反应1min此液好为六偶氮化新品红
③氯乙酸萘酚AS-D液:取氯乙酸萘酚AS-D(naphthol AS-D hcloroacetate)5mg溶于N,N-二甲基酰胺N,N-dimeth for mamide)2.5ml中。