注：土壤含水量的测定是将一定质量的土壤在105～110℃下烘干至恒重，再称干重。
（三）、土壤中放线菌的分离与计数
1、土壤稀释液的制备
按实验“稀释平板计数法”中的方法进行，将菜园土稀释至10－5。在稀释时，可在盛无菌水的三角瓶中加10滴100g/L的石炭酸溶液和50μg/m L 的制霉菌素以抑制细菌和霉菌的生长。
2、分离方法
采用稀释平板分离法，又可分为两种方法。
⑴混菌法：按“稀释平板计数法”中的“混合平板培养法”进行，所不同者是稀释度，应采用10－3、10－4、10－5三个稀释度，各做3个重复。
⑵涂抹法：按“稀释平板计数法”中的“涂抹平板计数法”进行，应采用10－2、10－3、10－4三个稀释度，各做3个重复。
3、培养
将上述接种过土壤悬液的平板倒置于28～30℃培养4～5d。
4、挑菌纯化
从平板中选择分离较好的放线菌菌落（应与细菌菌落区别开）较接斜面，并制片作纯度检查，若不纯，应进一步将该菌作稀释平板分离或划线分离，直至获得纯培养。
（四）、土壤中真菌的分离纯化与计数
1、土壤稀释液的制备
按实验“稀释平板计数法”中的方法进行，将土样稀释至10－4。
2、分离方法
采用稀释平板分离法。又可分为两种方法。
⑴混菌法：按“稀释平板计数法”中的“混合平板培养法”进行，所不同的是稀释度，应选10-2、10－3、10－4三个稀释度进行接种。
⑵涂抹法：按“稀释平板计数法”中的“涂抹平板计数法”进行，所不同的是稀释度，应选10-1、10－2、10－3三个稀释度进行接种。
3、培养
将上述接种土壤悬液的平板倒置于28℃培养3～5d。
4、挑菌纯化
从长有单菌落的平板中选取典型的真菌菌落（包括酵母菌菌落）转接斜面，并同时制片作纯度检查。若不纯，应进一步挑取该菌落采用划线分离，或制成菌悬液进一步作稀释分离，直至获得纯培养体为止。
5、计数
选取每皿菌落数在10～100之间的平板用于计数。不应遗漏酵母菌的菌落，必要时可制片检查，以免误为细菌菌落，具体方法见土壤中好气性细菌的分离与计数。
6、菌种保存
将分离到的真菌转接到PDA斜面上培养，待长好后，置于冰籍中保存，必要时进行深入研究。
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