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杜氏利什曼原虫形态学观察实验

2020.8.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理杜氏利什曼原虫又名黑热病原虫,主要寄生于人体巨噬细胞里,通过昆虫媒体白蛉的叮咬而传播。在人体的发育阶段为无鞭毛体, 又称利杜体(Leishman-Donovan  body),在白蛉体内的发育阶段是前鞭毛体(鞭毛体)。寄生于人和其它哺乳动物单核吞噬细胞内的无鞭毛体,虫体很小,卵圆形虫体大小为2.9~5.7×1.8~4.0 um;圆形虫体直径为2.4~5.2 um,常见于巨噬细胞内。经瑞氏染液染色后原虫胞质呈淡蓝色或深蓝色,内有一个较大的圆形核,呈红色或淡紫色。动基体(kinetoplast)位于核旁,着色较深,细小,杆状(图3-7)。在油镜下有时可见虫体从前端颗粒状的基体(basal  body)发出一条根丝体(rhizoplast)。基体靠近动基体,在光镜下难以区别。前鞭毛体寄生于白蛉消化道。成熟的虫体呈梭形,大小为14.3~20 um×1.5.~1.8 um,核位于虫体中部,动基体在前部。基体在动基体之前,由此发出一鞭毛游离于虫体外(图1)。前鞭毛体运动活泼,鞭毛不停地摆动。在培养基内常以虫体前端聚集成团,排列成菊花状。有时也可见到粗短形前鞭毛体,这与发育程度不同有关。

实验步骤

1. 活的鞭毛体:系取自三N氏培养基内的标本,在低倍或高倍镜下观察其活动。前鞭毛体的鞭毛常相互交织在一起,其排列常呈菊花形(图2)。

     

                        图2  杜氏利什曼原前鞭毛                                                          无鞭毛体

2. 中华白蛉(带毛白蛉): 白蛉体小,约为蚊虫的1/3大小,驼背状,全身密生细毛,灰黄色(详见实验白岭一节)。

3. 黑热病田鼠解剖标本(瓶装),与正常田鼠解剖标本相比较,注意黑热病田鼠内脏的颜色和肝脾的大小。


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