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早期胚胎培养及形态学观察实验

2020.8.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验方法原理 鸡胚胎发育可分为两个阶段:成蛋阶段的发育与成雏阶段的发育。1、胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育,是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是:受精卵→卵裂→囊胚期→原肠期。当胚胎发育到原肠期时,已分化形成内胚层和外胚层,从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘,当卵排出体外,因温度下降,胚胎生长发育随即停止。2、胚胎在孵化过程中的发育卵排出体外后,保存在18℃以下的环境中,胚胎发育基本处于静止状态。当入孵后,胚胎即开始发育。胚胎在孵化过程中发育的时期称孵化期。鸡的孵化期为21天。种蛋入孵后,胚在原肠期形成的同时,上胚层像个碟状圆盘,在其末端,细胞不断地向中线集中,形成一条细胞带,称原条。原条细胞通过原沟的底部逐渐转人外胚层与内胚层之间,并分别向两侧扩展,这些位于内外胚层之间的细胞称为中胚层。原条细胞也逐渐转入外胚层与申胚层之间,并分别向前伸展,伸展的结构称为头突,后发育成脊索。脊索是胚胎期的纵轴支持器官,最终为脊柱所代替,随着胚胎的不断发育,由外、中、内三个胚层逐渐形成各种腺体、器官、骨骼、肌肉、皮肤、羽毛和喙,最后形成新的机体——雏鸡。

试剂、试剂盒 固定液生理盐水胭脂红染液

仪器、耗材 培养箱深瓷碗 弯头直头小剪刀、尖头手术镊子吸管 培养皿

实验步骤

1、胚胎培养:不同受精时间受精鸡蛋,注明日期和时间,置入温箱,其温度应保持在37 ℃~38 ℃之间,温箱内放半杯水,以保持适当之温度。

2、胚胎提取:每组(6人)取不同孵化时间(3天、7天、10天)鸡蛋各2个,置入温水内(最好生盐食盐水)轻轻滚动,待其自由静止时,胚盘即位于上部,在温水中用尖镊子将露出水面之蛋壳轻轻击破,用镊子剥去卵壳,使全部胚盘露出,用弯头剪刀沿圆形胚盘边缘剪一圆圈(为防止蛋白滚动,胚盘反转,可用吸管将蛋白吸出一部分),用尖镊子将胚盘移至培养皿内,生理盐水洗数次,并将胚盘下面粘连之卵黄及胚上的卵黄膜在盐水中摆脱。用吸管将盐水吸出,胚盘平贴在培养皿底上,固定 5 ~ 10分钟。

3 、染色将胚胎浸入硼砂胭脂红液内染 20分钟。

4、 制作鸡胚裱片,将胚盘直接裱于玻片上,吸去过多水分。


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