10X丽春红染液
丽春红S 2g
三氯乙酸 30g
磺基水杨酸 30g
蒸馏水至 100ml
使用时将其稀释10倍。
TBS缓冲液(100mmol/ L Tris?HCl pH7.5,150mmol/L NaCl)
1 mol/ LTris•HCl(pH7.5) 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
TBST缓冲液(含 0.05%Tween20的TBS缓冲液)
20%Tween20 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用,最好现用现配。
封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST缓冲液)
脱脂奶粉(国产,安怡牌) 5g
TBST 100ml
溶解后4℃保存。使用时,恢复室温,用量以盖过膜面即可,一次性使用。
洗脱抗体缓冲液(100mmol/L 2-Mercaptoethanol,2%SDS,62.5m mol/L Tris•HCl pH6.8)
14.4 mol/L 2- Mercaptoethanol(β-巯基乙醇) 700 ml (通风厨里加)
SDS 2g
0.5mol/L Tris•HCl(pH6.8) 12.5ml
超纯水至 100ml
配制时,在通风厨内进行。 4℃保存。可重复使用1次。
显影液(5X)
自来水(加热至50℃) 375ml (以下药品加到温水中)
米吐尔 1.55g
亚硫酸钠(无水) 22.5g
碳酸钠(无水) 33.75g
溴化钾 20.95g
补水至 500ml
配制时,上述药品应逐一加入,待一种试剂溶解后,再加入后一种试剂。4℃保存。使用时用自来水稀释至1倍。
定影液
自来水(50~60℃) 700ml (以下药品按顺序加入前者溶解后再加后者)
硫代硫酸钠 240g
亚硫酸钠(无水) 15g
冰乙酸 12.6ml
硼酸 7.5g
钾明矾 15g(水温冷至30℃以下时再加入)
加水定容至1000ml,室温保存
抗体
用TBST稀释至一定浓度使用,每张膜需0.5ml
化学发光试剂
购自北京中山公司,为Santa Cruz产品,分A和B两种试剂。