1、生物样本保存应该在什么样的温度条件下?
生物样本的保存温度与样本的处理方式、样本特性、用途和保存时间直接相关，但科学界统一的共识是，如要长期保持生物样本的离体时的状态，必须保存在-135度玻璃化温度以下，只有在此温度以下，生物分子的微观移动才会完全停止，达到“时间停止运行”的状态，所以对生物活性要求最高的脐带血、精子和细胞保存都是保存于-135度以下的温区。
2、能达到玻璃化温度以下的存储方式有哪些?
在低温生物学的推动下，出现了几种能达到玻璃化温度以下的存储方式，各有其优缺点，下面逐一讨论：
A. 机械制冷冰箱：采用类似于-80度冰箱的原理，但使用了不同的冷媒以实现更低的温度，最低可达到-150度。
–优点：保留了冰柜的方形结构，可以最大化利用空间，同时插电即可使用，用户体验比较方便
–缺点：温度波动大，且距离玻璃化温度过近(差15度)，在操作中极易发生样本冻融和失效；且功耗大，故障率较-80度冰箱要高；
B. 液氮罐：使用高真空绝热容器，内容器充满液氮，将样本浸泡于液氮里
–优点：液氮的沸点为-196度，故而能确保只要有液氮，样本温度都在-196度，温度均一；
–缺点：由于液氮的流动性和蒸发性，带来了样本交叉污染和冻存管爆管的问题；另外液氮供应在偏远地区及市中心都比较困难，而中小型库使用移动式补给罐也存在安全风险；
C. 气相液氮罐：使用高真空绝热容器，内容器底部存放液氮，通过液氮蒸发形成的对流进行降温
–优点：既能保证良好的温度均一性(-180度至-190度)，又解决了液相罐的交叉污染和爆管问题；
–缺点：液氮供应在偏远地区及市中心都比较困难，而中小型库使用移动式补给罐也存在安全风险；
D. 复合制冷液氮冰箱：使用斯特林制冷机和液氮冷媒，将液氮蒸发后的气体通过冷头冷凝后回流
–优点：实现了插电式使用的便利性和在液氮温区的样本安全性，而免去了液氮补给的困扰；
缺点：由于结构较普通的液氮罐更为复杂，成本相对比较高；
3、是不是只要样本保存在玻璃化温度以下就能保证在取用时能再现样本活性?
再现样本活性不仅取决于样本的存储温度，当样本离体开始到最终样本取用，整个过程涉及一系列的操作流程，不同的冷冻剂有不同的降温速率和模式，而一旦达到存储温度后，必须保证温度的稳定性，避免出现升温。而从样本降温到取出往往面临各种升温场景，当一个冻存盒从-180度环境中被取出时，盒内的冻存管温度在一分钟内温度可能上升30-50度，从而造成一次解冻伤害。
文章链接：中国仪器批发网 http://info.china17pf.com/newsdetail/1171.html
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