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如何降低水中微生物含量?

2021.3.01
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

水是生命之源,是我们赖以生存的物质资源之一。
 
在实验室中也不例外,水作为不可或缺的物质之一,往往会对实验结果产生关键影响。
 
用来评价水质的常用指标有电阻率、总有机碳、内毒素、微生物等。
 
 
微生物作为水中主要的污染物之一,在实验中影响复杂,很难控制,容易被忽视。

今天,Q博士就来给大家讲讲如何降低水中的微生物含量。
 
1.什么是微生物?
微生物包括真菌、细菌、病毒以及一些小型的原生生物。
给大家举几个例子吧。

微生物举例        直径
酵母      50 µm –  4 µm
细菌      5 µm  –  0.3µm
病毒         0.3µm –  0.01 µm

 

 

2. 微生物及生物膜会引起哪些问题?
① 纯水中的微生物会污染分析系统。

  1. ②系统中的温度环境会促进细菌生长。

  2. ③ 一旦形成顽固的生物膜,很难清除干净。

④ 微生物及代谢物会产生各种离子和酶,其带来的各种干扰和影响无法控制。

  1. ⑤生物膜活性及迁徙能力会导致持续污染。

 

 
3. 各类标准和法规对微生物有哪些要求?
①分析实验类标准


GB/T6682-2008 GB/T 33087-2016 ASTM D1193-06
微生物指标 NA <10cfu/l NA
内毒素和热源 NA NA <0.25EU/ml

 
②制药类纯化水标准


中国药典 EP USP
微生物指标 <100cfu/ml <100cfu/ml <100cfu/ml
内毒素和热源 NA <0.25EU/ml NA

 
③临床类纯化水标准


CLSI WS/T 574-2018



参数 CLRW 标准值 SRW标准值 IFW 试剂用纯化水 特殊试剂用纯化水
Siemens
(Advia)
Roche
(Cobas)





细菌 < 10 cfu/mL < 10 cfu/mL < 10 cfu/mL < 10 cfu/mL < 10 cfu/mL < 10 cfu/mL

 

 
4. 降低微生物含量的方法有哪些?
这里Q博士为大家介绍一下膜过滤法。

跟Q博士一起来做实验吧!
 
实验1:水在不同平板上(R2A&TSA)孵育细菌。

  
通过实验可以发现,R2A更适合培养在纯水甚至超纯水中的细菌。
实验结论:纯水中细菌培养用培养基推荐 (R2A vs TSA) R2A。
 
 
实验2:水被不同光线(Elix & Elix UV)照射。水在不同Elix系统中的微生物变化。
 

 
)经过两种不同处理,不同水箱条件对微生物会产生哪些影响?
2020060562515820.jpg   2020060562528484.jpg
实验结论:推荐使用紫外照射Elix UV+ ASM tank对水进行处理。
 
思考题:Milli-Q系统中如何抑制用水中微生物的生长?
 
Milli-Q对微生物的纯化方法。
过滤膜 (0.2 µm screen filters, ultrafilters)
紫外照射 (254/265 nm)
Milli-Q将过滤膜和紫外照射融合在一条完整的纯化链中,以达到对微生物的有效控制。
两种方法的“联手”可以有效控制水中微生物的生长,提供符合实验室要求的纯化水。


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