目前,世界各国对于控制饮用水的卫生质量,常采用细菌总数这个指标。我国《生活饮用水卫生标准》(GB5749—2006)中规定生活饮用细菌总数每毫升不得超过100个。
(1)细菌总数的测试方法采用标准平皿法对水样中的细菌作计数,这是一种测定水中好氧、兼性厌氧的异养细菌密度的方法。由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状或成团的形式存在,此外没有单独的一种培养基等要求,所以该法得到的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。
细菌总数是指1mL水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24h培养后所生长的细菌菌落的总数。
(2)检验步骤在无菌操作条件下,用灭菌移液管吸取1mL充分混匀的水样(水样视污染情况作适当稀释)注入灭菌培养皿中接着再注入约15mL已融化又冷却至45℃左右的培养基,立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混合。每一水样做两个平行。另用一只灭菌的培养皿,倾注普通培养基15mL,作空白对照。待培养基凝固后,放入37℃培养箱中倒置培养24h后进行菌落计数。
(3)结果分析平皿菌数的计算,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查以免遗漏,也可借助于菌落计数器计数。记下各培养皿的菌落数后,求出同一稀释比的平均菌落数。两个平皿中菌落数的平均数乘以稀释倍数,即得1mL水样中的细菌总数。
在计算菌落数时,有较大片状菌落生长的平皿不能采用,而应以无片状菌落的平皿进行菌落计数。若片状菌落不到培养皿的一半而其余一半菌落分布又很均匀则可以半皿计,再乘以2代表全培养皿的菌落数。不同情况下的计算方法介绍如下。
①选择平均菌落数在30~300之间者进行计算。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,可以此作为平均菌落数乘以稀释倍数。
②若有两个稀释度的平均菌落数均在30~300之间,则应按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2,应报告两者的平均数;若大于2,则报告其中较少的菌落总数。
③若所有稀释度的平均菌落数均大于2,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
④若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300,则应按最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
菌落计算的报告方式,菌落总数在100以内时,报告实有数字;大于100时,采用两位有效数字计算。若菌落数为“无法计算”时,应注明水样的稀释倍数。
通常认为,1mL水中,如果细菌总数为10~100个为极清洁水;100~1000个为清洁水;1000~10000个为不太清洁水;10000~100000不清洁水;多于100000个为极不清洁水。
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