◆需氧菌。初次分离培养时，最好在5%～10%C02环境中，以促进其生长。
◆普通培养基中须加入X和V因子，才能生长。
◆巧克力琼脂平板上生长较佳：圆形、光滑、湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。48h后可形成直径1.0～1.5mm灰白色较大的菌落。有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。
◆卫星现象：有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上共同培养时，由于后者能合成较多的V因子，可促进流感嗜血杆菌的生长，在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小。
◆液体培养基中：有荚膜的菌株呈均匀混浊生长，无荚膜的R型菌株则为颗粒状沉淀生长。
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