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补体结合试验知识点

2021.3.24
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

将免疫溶血作为指示系统,用以检测另一反应系统中抗原或抗体。该方法并非用于补体的检测,而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。

一、试验原理

包括:

①反应系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原);

②补体系统;

③指示系统:SRBC与相应溶血素预先结合,成为致敏绵羊红细胞。

反应分两步进行。首先反应系统与补体作用;第二步:指示系统利用剩余补体反应。如反应系统中有抗体或抗原,则形成免疫复合物而固定和消耗补体,使后加入的SRBC-抗SRBS指示系统无多余补体可利用,则无溶血反应发生,反之亦然。不溶血为补体结合试验阳性。

二、试验方法

(一)试剂的准备

1.抗原或抗体

2.补体:

采用豚鼠血清为补体。

3.待测标本:

及时分离血清用于检测或-20℃保存备用。试验前,应先将血清56℃加热30分钟(或60℃3分钟)以灭活补体。

血清标本遇有抗补体现象时,可作下列处理:

①加热灭活时提高12℃;

②-20℃冻融后离心去沉淀;

③以3mmol/L盐酸处理;

④加入少量补体后再行灭活;

⑤以白陶土处理;

⑥通入CO2;

⑦以小白鼠肝粉处理;

⑧用含10%新鲜鸡蛋清的生理盐水稀释血清。

(二)正式试验:小量法较为常用。

三、方法评价

补体结合试验是一经典的免疫技术,具有灵敏度高、可检测的抗原或抗体范围广泛等优点。该方法无需特殊设备,结果容易观察,试验条件要求不高,一般医院均具备开展的条件。


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