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补体结合试验知识点

2021.12.08
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  将免疫溶血作为指示系统,用以检测另一反应系统中抗原或抗体。该方法并非用于补体的检测,而是利用补体的溶细胞作用进行各种物理状态的抗原抗体测定。

  一、试验原理

  包括:

  ①反应系统:已知抗原(或抗体)与待测抗体(或抗原);

  ②补体系统;

  ③指示系统:SRBC与相应溶血素预先结合,成为致敏绵羊红细胞。

  反应分两步进行。首先反应系统与补体作用;第二步:指示系统利用剩余补体反应。如反应系统中有抗体或抗原,则形成免疫复合物而固定和消耗补体,使后加入的SRBC-抗SRBS指示系统无多余补体可利用,则无溶血反应发生,反之亦然。不溶血为补体结合试验阳性。

  二、试验方法

  (一)试剂的准备

  1.抗原或抗体

  2.补体:

  采用豚鼠血清为补体。

  3.待测标本:

  及时分离血清用于检测或-20℃保存备用。试验前,应先将血清56℃加热30分钟(或60℃3分钟)以灭活补体。

  血清标本遇有抗补体现象时,可作下列处理:

  ①加热灭活时提高12℃;

  ②-20℃冻融后离心去沉淀;

  ③以3mmol/L盐酸处理;

  ④加入少量补体后再行灭活;

  ⑤以白陶土处理;

  ⑥通入CO2;

  ⑦以小白鼠肝粉处理;

  ⑧用含10%新鲜鸡蛋清的生理盐水稀释血清。

  (二)正式试验:小量法较为常用。

  三、方法评价

  补体结合试验是一经典的免疫技术,具有灵敏度高、可检测的抗原或抗体范围广泛等优点。该方法无需特殊设备,结果容易观察,试验条件要求不高,一般医院均具备开展的条件。

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