双歧杆菌血凝特性的研究（三）

　　2.4　血凝素受体的确定　为确定血凝素受体的成分，观察了人O型、人B型及绵羊红细胞悬液经各种因素处理对血凝的影响，结果见表4，过碘酸钠能抑制血凝；胰蛋白酶无此作用。

　　进一步观察了各种糖对血凝的影响，结果1%的葡萄糖、乳糖、蔗糖、D-果糖、L-山梨糖、棉子糖、麦芽糖、纤维二糖、D-木糖、鼠李糖及D-甘露糖均不能抑制3株双歧杆菌对人O型及人B型红细胞的凝集。

表4　红细胞悬液经各种因素处理对血凝的影响

　　3、讨　论　　

        通常根据细菌血凝能否被D-甘露糖抑制，将血凝分为甘露糖敏感(MSHA)和甘露糖抵抗血凝(M rHA)。由于许多细菌能凝集不同种的红细胞，细菌的血凝特性被认为是其一项重要的生物学特征，已用于一些细菌的鉴定分型。例如根据对人及各种动物红细胞凝集的差异幽门螺杆菌表现出多种血凝类型，并发现了多种幽门螺杆菌的血凝毒素及其受体［8，9］，这对研究其粘附定植、致病机制起到了重要的作用。本研究表明，双歧杆菌能凝集人和多种动物的红细胞，表现为单一的血凝类型，为MRHA；已有报道细菌血凝活性的表达与细菌的生长条件有密切关系。本研究观察了在硫乙醇酸盐液体培养和双歧杆菌选择性固体培养条件下双歧杆菌的血凝活性，发现两者无明显差异。

　　有关血凝素及其受体的性质与结构，在肠道病原菌方面研究较为深入。如众所周知的Ⅰ型菌毛表达甘露糖敏感血凝(MSHA)，能够识别红细胞膜上的α-D-甘露吡喃糖基受体；而Ⅳ型菌毛引起MRHA，识别人类P血型系统红细胞膜上糖苷脂的半乳糖-1-4/α-半乳糖受体［4］。幽门螺杆菌既能表达细菌表面血凝素，又能表达可溶性血凝素［8，9］。本研究发现，液体培养的双歧杆菌的血凝素存在于耗尽培养液上清中，说明双歧杆菌也存在着表面和可溶性血凝素。LTA是Gram阳性菌的特征性膜相关多聚体，它是由线性的磷酸甘油多聚体经1，3磷酸二脂键交联组成的两性分子，其疏水端与细胞膜上的脂类相联；亲水端则穿过细胞壁肽聚糖层，到达菌体表面。LTA不仅能致敏红细胞，而且是一些Gram阳性菌的粘附素，大量研究发现，LTA存在着能与BSA结合的位点，LTA与BSA结合或经碱水解脱脂后，其致敏红细胞及粘附力丧失，进一步证实了LTA中的脂质部分为其活性部分［7，10，11］。本研究结果表明，双歧杆菌的LTA粗提物能凝集人O及人B型红细胞，其血凝活性能被BSA和NaOH抑制，提示LTA是双歧杆菌的血凝素。本结果还证实双歧杆菌血凝素的受体为糖类，因为过碘酸钠能裂解糖的羟基基团间的C-C键，破坏糖的结构。

　　由于血凝试验简便易行，结果直观容易判断，已用作研究细菌与细胞相互粘附的一个模型。但本研究发现，双歧杆菌的血凝与粘附是由不同物质所介导的，其血凝素为LTA，而粘附素则为一种蛋白质［12］。

　　参考文献

　　［1］Armstrong JA,Cooper M,Goodwin CS,et al.Influence of soluble haem agglutins on adherence of Helicobacter pylori to hep-2 cells.J Med Microbiol,1991,34:181～187.

　　［2］Oyston PCF and Handley PS.Surface components of Bacteroides fragilis involved in adhesion and haemagglutination.J Med Microbiol,1991,34: 51～55.