分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

写文章 全自动生化分析仪与化学发光分析仪有何不同?

2021.5.07
头像

xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  什么是化学发光?

  之前的一篇文章,我们讲了化学发光是免疫诊断的一种,是利用抗原抗体之间的特异性反应来测定体内疾病标志物浓度,从而判断人体身体状态的诊断方法,广泛应用于传染病、心脏疾病、肿瘤、妊娠检测等。

  对于生化诊断来说,生化诊断测试的糖类,脂肪类等在人体内的含量普遍为g/L-μg/L水平。

  而对于化学发光来说,被检测物质的浓度低,免疫诊断的对象抗原、抗体等仅为μg/L—pg/L水平, 造成对整个检测系统的精密度要求高,仪器与试剂体系封闭;化学发光自动化难度高,对技术有更高的要求。

  目前主流的化学发光技术有直接化学发光(异鲁米诺(新产业)、吖啶酯(雅培))、间接(酶促)化学发光(丹纳赫、迈瑞、安图)、电化学(罗氏),各有优劣势。

  今天这篇文章我们主要来讲讲化学发光

  化学发光(chemiluminescence)是指伴随化学反 应过程所产生的光的发射现象。某些物质(发光剂) 在化学反应时,吸收了反应过程中所产生的化学能, 使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃 迁到激发态,当电子从激发态回复到基态时,以发 射光子的形式释放出能量,这一现象称为化学发光。

  化学发光免疫分析的类型

  一.直接化学发光免疫分析

  用吖啶酯直接标记抗体(抗原),与待测标本中相应的抗 原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂(H2 O2)和 NaOH使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、 发光 。 由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生 的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从 标准曲线上计算出待测抗原的含量。

  二.化学发光酶免疫分析

  化学发光酶免疫分析(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)是用参与催化某一化学发光反应的酶 如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗 体,在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成 固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入 底物(发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接 收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们 传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。

  (1) 辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析

  该分析系统采用辣根过氧化物酶(HRP)标 记抗体(或抗原),在与反应体系中的待测标 本和固相载体发生免疫反应后,形成固相包 被抗体-待测抗原-酶(HRP)标记抗体复合 物,这时加入鲁米诺发光剂、H2O2和化学发 光增强剂使产生化学发光。

  (2) 碱性磷酸酶标记的化学发光免疫分析

  该分析系统以碱性磷酸酶 标记抗体(或抗原), 在与反应体系中的待测标本和固相载体发生 免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶 标记抗体复合物,这时加入AMPPD发光剂, 碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。

  三.电化学发光

  电化学发光免疫分析 (electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)是以电化学发光剂三联吡啶钌标记 抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体, 在电场中因电子转移而发生特异性化学发光 反应,它包括电化学和化学发光两个过程。

  主流的发光技术各有千秋, Roche(电化学)在肿瘤项目上占优,雅培(吖啶酯)在传染病项目上占优,而丹纳赫(ALP)在甲功激素项目上占优。

网络
仪器推荐
文章推荐