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认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事
1、TaqMan探针位置尽可能靠近扩增引物,但不能与引物重叠。
2、长度一般为18~40碱基。
3、G+C含量控制在40%~80%左右。
4、避免连续相同碱基的出现,特别是要避免GGGG或更多G出现。
5、在引物的5'端避免使用G。
6、选用比较多的碱基C。
7、退火温度Tm控制在68~700C左右。