凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。细胞的纯化或细胞克隆技术是细胞培养工作的基础。
原代细胞的取材
人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。
一、取材的基本要求
1．取材要注意新鲜和保鲜
2．应严格无菌
3．防止机械损伤
4．去除无用组织和避免干燥
5．应注意组织类型、分化程度、年龄等
6．作好记录
二、各类组织的取材技术
皮肤和粘膜的取材 内脏和实体瘤的取材血液细胞的取材
骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材动物组织取材
人胚体组织取材
鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材
皮肤和粘膜的取材
主要取自于手术过程中的皮片，方法似外科取断层皮片手术操作，但面积一般 2~4 平方厘
米。
内脏和实体瘤的取材
内脏除消化道外基本是无菌的，但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位，实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域，要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。
血液细胞的取材
血细胞、淋巴细胞的取材，一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中（如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等）分离细胞，取材时应注意抗凝。
骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材
严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁 PBS 洗两次，再用培养液洗一次后即可培养，不宜低温存放。
动物组织取材
1、鼠胚组织取材
首先用引颈或气管窒息致死法处死孕期合适的动物，然后将其整个浸泡在含有 75%酒精的烧杯中，5 分钟后（注意时间不能太长，以避免酒精从口或其他通道进入体内，影响组织活力），取出动物，在消毒过的木板上可用无菌的图钉或大头针固定四肢，切开皮肤，用无菌操作法解剖取胚或用无菌止血钳挟起皮肤、用无菌眼科剪沿躯干中部环形剪开皮肤，用止血钳分别挟住两侧皮肤拉向头尾，把动物反包，暴露躯干，然后再固定，更换无菌解剖器材， 采用无菌操作法解剖取出胚胎。
2、幼鼠胚肾（或肺）取材
幼鼠采用上述方法处死消毒后，腹部朝上固定在木板上，先切开游离毛皮并拉开至两侧：然后采用无菌法打开胸腔取肺，或背部朝上固定在木板上，先将背部毛皮切开游离并拉向两侧，
然后采用无菌法从背部打开腹腔取肾。
人胚体组织取材
取材方法与鼠类相同
鸡（鸭）鸟类胚胎组织取材步骤
（1） 取孵化至适当胚龄（9~12 天）的胚蛋，用照蛋灯在暗处灯检，若有丰富血管、胚体有运动的胚蛋，说明胚体发育良好，并用有色笔划出气室和胚体位置。
（2） 将胚蛋置于蛋架上，先用温水清洗蛋壳，再用 75%酒精棉球擦干；
（3） 经碘酒、75%酒精消毒后，在无菌条件下采用无菌法用剪刀或中号镊子打开气室，沿气室边缘去除蛋壳；
（4） 用眼科镊撕去壳膜，暴露出鸡胚；
（5） 用弯头镊轻挑起胚头，取出胚胎，放入无菌平皿中，解剖取材。
原代细胞的分离和制作
人或动物体内（或胚胎组织）由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用 1000r/min 的低速离心 10 分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。
二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液， 可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
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