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涂片找抗酸杆菌操作规程(改良碱性复红法)

2021.5.20
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

1 检验目的

检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。

 

2 原理

结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。

 

3标本要求

(1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等

(2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)

(3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。

 

4 容器和添加剂类型

痰盒、尿杯、试管等

 

6 试剂

(1)       试剂名称:结核菌染色液

(2)试剂生产厂家:广东省结核病研究所统一配制

(3)包装规格:3X500ML

(4)试剂盒组成:

试剂1:石碳酸复红液

试剂2:酸性酒精溶液

试剂3:亚甲基蓝溶液

 

7设备:

 

8操作步骤

⑴涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。

⑵水洗(之后尽可能将水沥干)。

⑶加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。

⑷水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。

⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。

(6)镜检。

 

干扰和交叉反应

麻风菌可能对检验结果产生影响。

 

10   生物参考区间

涂片未见抗酸杆菌

 

11 患者检验结果的可报告区间

涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌

 

12 临床意义

结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,成分与其代谢产物引起反应(Ⅳ型)导致一系列组织学上的意义。


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