肿瘤浸润淋巴细胞的数量（TIL）与多种人类肿瘤相关联，包括非小细胞肺癌（NSCLC）。以前的研究表明，不同的TIL亚型在癌症进展中发挥不同的生物作用和它们对疾病预测的贡献仍不清楚。研究者使用两种方法量化非小细胞肺癌中的TIL亚型，并确定与肿瘤特征和发生过程的相关性。

实验中，通过复合免疫荧光染色结合酪胺信号放大和高温灭活，研究人员同时显影了I-IV期NSCLC代表组织切片中所有细胞的细胞核，包括上皮细胞，T辅助细胞，细胞毒性T细胞，B淋巴细胞和调节性T细胞。每个TIL细胞亚群的数量基于多光谱荧光分析和组织/细胞图像分割算法软件（PerkinElmer）中进行计数。标志物是用定量免疫荧光法（QIF）AQUA方法测定。

非小细胞肺癌样本的TIL含量波动非常大，每片肿瘤取样点淋巴细胞数量从0到2717不等。 TIL含量中位数为23.9个T辅助细胞，55.8细胞毒性T细胞，59.7 B淋巴细胞和6.1的调节T细胞。尽管CD4+，CD8+和CD20 +细胞数量在NSCLC组织亚型之间比较，鳞癌调节性T细胞（CD4 + /FOXP3 +细胞）显著高于腺癌（p=0.03）。CD8 +或CD20 + TIL数量增加与总生存期延长（P <0.05）显著相关，但是CD4 +和Foxp3 +细胞数量不具备这一特点。

该方法能同时和准确地量化肺肿瘤样本中多种TIL细胞亚群的数目。实验结果表明，细胞毒性T细胞和B淋巴细胞水平提高具有非小细胞肺癌的术后临床价值，但T辅助细胞或T调节细胞不具备类似的作用。 TIL各亚群在肿瘤微环境的准确定量有助于研究新型抗癌免疫疗法的局部效应。