、组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方法制备成细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～2min。 3、离心，弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀。4℃离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。
二、组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)
1、制备细胞悬液：新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，制备细胞悬液，离心弃上清。
2、裂解：加入细胞5倍细胞沉淀体积的1×RBC Lysis Buffer，轻柔吹打混匀裂解。
3、加入PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
4、离心5min，弃红色上清，本离心步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
三、血液样本的快速操作(无需洗涤)
1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的1×RBC Lysis Buffer，轻轻吹打混匀，裂解4～15min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
2、加入 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。
3、离心，弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
四、血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血，离心，弃上清。
2、 裂解：加入1×RBC Lysis Buffer，轻柔吹打混匀，裂解1～5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。
3、离心：弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤： 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀重悬沉淀；4℃离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。
首页
