一、何谓原代培养？
原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，即组织直接从机体获取后，通过组织块长出单层细胞，或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养，在*传代前的培养可认为是原代培养。
原代培养的过程指动物的组织或器官从机体取出后，经机械法或各种酶类（常用胰蛋白酶）和螯合剂（常用EDTA）处理，使之分散成单个细胞，加入适量培养基，置于合适的培养容器中，在无菌、适当温度和一定条件下，使之生存、生长和繁殖的过程。
二、原代培养的方法
•组织块培养法：在无菌条件下，从有机体取下组织，用平衡盐缓冲液漂洗数次后剪碎，加培养液进行培养的方法。是常用的、简便易行和成功率较高的方法。
•酶消化法：将组织剪成小块，然后用蛋白酶消化成单细胞悬液后，再接种培养的方法。
•悬浮细胞培养法：对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
•器官培养：从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，其特性仍保持原有器官细胞的组织结构和联系、并能存活，器官培养的目的和技术均与单层细胞培养不同，但可利用器官培养对器官组织的生长变化进行体外观察。并观察不同培养条件研究对器官组织的影响。器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。体外器官培养为临床上的器官移zhi创造了便利的条件。器官培养的条件与细胞培养不同，要有特殊的要求。
三、前期准备及器材处理
1.前期准备
在您带上手套开始细胞培养之前,先检查一下移液管和瓶子的数量是否充足,以免在开始实验后再次出入操作台.
这样可以降低细胞污染的风险.
细胞培养基也应先预热,选择只预热部分培养基而非整瓶加热,不但可以节约实验时间,而且可以避免因反复加热培养基而造成的蛋白质降解.
结束操作后,别忘了培养基对光敏感,应尽可能避光保存.
2.生物安全柜的消毒及布局
保持安全柜内的整洁有序，将所有物品置于直视范围内。
向放入安全柜内的所有物品喷洒70%乙醇，擦拭清洁进行消毒。
在安全柜中部开阔处放置细胞培养容器；移液器置于右前方易于取用；试剂和培养基置于右后方便于吸取；试管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放废液。
3.培养瓶/皿等物品的无菌操作
无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子，不得将其开放暴露于环境中，操作完成后尽快盖上盖子，取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。
进行无菌操作时不要说话、唱歌或吹口哨。尽快完成实验，以尽量避免污染。
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