在微卫星不稳定(MSI)规范化检测的过程中,检测位点的选择至关重要。因为,MSI是检测微卫星的状态,而人类有1900万个微卫星位点,挑选的位点多了检测起来比较困难,挑选的位点少了则不具备代表性。国内,随着第一个MSI检测试剂盒获批,近期MSI检测也成了临床关注的热点。然而,虽然MSI的规范化检测悄然到来,但是,MSI位点选择的重要性仍然在被忽视,市面上仍然存在无指南共识推荐及缺乏临床数据证实的Panel在混淆视听。之前许多临床医生认为MSI在中国的发生率偏低,甚至其检出率低于MMR蛋白免疫组化方法,很大一部分原因是之前国内的MSI无证试剂盒位点选择有误的问题所致。国际上,MSI位点的选择其实早在30年前已经有定论,30年的过程中虽然修修补补“新人”辈出,但是,最终的代表性位点,从未有过变化——那就是5个位点的检测Panel(PCR+毛细管电泳法),包括两套位点,一套是NCI的2B3D
Panel(BAT-25、BAT-26、D5S346、D17S250、D2S123),另一套是5个单核苷酸的Panel(通常指Promega:BAT-25、BAT-26、NR-21、NR-24、MONO-27)。《NCCN遗传和家系风险评估指南》推荐了2B3D NCI Panel和5个单核苷酸的Panel。
2021年《结直肠癌分子检测高通量测序专家共识》,其中关于MSI检测的位点推荐非常明确,建议采用NCI推荐的2B3D位点,同时指出“临床应用时建议使用NMPA批准的MSI试剂盒”。
4月24日刚在北京更新过的《CSCO结直肠癌诊疗指南(2021版)》,其中对于MSI检测明确提出使用NCI的2B3D位点进行检测!
从上面我们可以看到,目前MSI检测金标准的方法是PCR+毛细管电泳法,而位点选择只有两种,一种是NCI的2B3D Panel,另外一种是Promega的5个单核苷酸Panel。之所以目前临床工作中不断强调MSI检测位点的选择,是因为这会大大影响到MSI检出率,位点选择错误会导至MSI-H患者的漏诊,这一点也是有数据支持的。因此,对临床或者病理科老师而言,MSI检测的位点选择,其实已经非常明确,为了减少漏诊,为了每一位MSI-H患者被能被诊断出来,获得生的希望,遵循临床数据,遵循指南推荐,采用最规范化的方法检测MSI!