Luminex MultiCode -RTx 技术解析——如何进行多重PCR检测？

本周 Diasorin 索灵18亿美金收购Luminex的确引起蛮大轰动和反响，luminex自身老牌企业科研和诊断通吃，免疫和分子通吃。四大技术加持，今天我们先看看MultiCode®，如何实现独家ZL的多重PCR检测！

Luminex的 MultiCode® 产品为基于实时PCR和多重 PCR 的检测提供了一个灵活的平台。MultiCode 产品基于独特的ZL的MultiCode 碱基 isoC 和 isoG。合成的 isoC:isoG DNA 碱基对的氢键结合方式有别于天然存在的碱基对。其结果是，MultiCode 碱基 isoC 和 isoG 只能彼此相互进行碱基配对。此特性使得 iso 碱基在扩增过程中可进行位点特异性结合。

MultiCode®-RTx  独家ZLisoC 和 isoG配对（划横线部分为更换后基团）

IsoC 和 isoG 碱基是Luminex 下一代基于核酸的MultiCode 检测试剂的基石。基于MultiCode 的PCR 检测试剂可高特异性的用于传染性疾病和基于遗传基因的早期检测。

第一步：引物扩增，一条正常引物，一条带有isoC和reporter基团；

第二步：DNA聚合酶进行扩增，扩增子代链中带有isoC+报告基团。

第三步：扩增，淬灭过程的实现。

整个反应体系中，除了常规dNTP外，还需要加入带有淬灭基团的isoG。在聚合酶进行扩增过程中，一旦遇到带有isoC的扩增模板链，就会使用且仅会使用淬灭基团的isoG。此处原理就类似分子信标或Taqman探针，报告基团和淬灭基团靠近，荧光消失。当进行升温时，发生解链，荧光信号重新恢复。

准确地讲，这一步在靶序列进行第二轮扩增时就会发生。

第四步：结果分析，所以不难理解Luminex的 MultiCode® 的扩增曲线和溶解曲线均为倒置的。

看起来，是不是有点出乎意料。如果要进行多重PCR，选择不同的荧光染料就可以实现了。