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pcr如何设计引物?如何进行扩增?

2021.8.06
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超级艾蛋木啊

致力于为分析测试行业奉献终身

引物长度和专一性
常见的引物长度为18-30个碱基。 短的引物(≤15碱基)能非常高效地结合, 但是它们的专一性不够。较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下。同时应避免编码单一序列和重复序列的引物。
平衡GC含量,避免GC-和AT-富集区域
引物的GC含量应介于40%~60%之间。应避免聚-(dC)-或聚(dG)-区域,因为它们会降低退火反应的专一性。聚-(dA)-和聚(dT)-也应避免,因为这样会形成不稳定的引物-模板复合物,从而降低扩增效率。

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