电化学发光免疫分析原理

　　1、电化学反应过程：在工作电极上(阳极)加一定的电压能量作用下，二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+ 释放电子发生氧化反应而成为三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+，同时，电极表面的TPA也释放电子发生氧化反应而成为阳离子自由基 TPA+，并迅速自发脱去一个质子而形成三丙胺自由基 TPA·，这样，在反应体系中就存在具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+和具有强还原性的三丙胺自由基 TPA·。

　　2、化学发光过程：具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+和具有强还原性的三丙胺自由基 TPA· 发生氧化还原反应，结果使三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+ 还原成激发态的二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+，其能量来源于三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+与三丙胺自由基 TPA· 之间的电势差，激发态 [Ru(bpy)3]2+以荧光机制衰变并以释放出一个波长为 62Onm 光子的方式释放能量，而成为基态的 [Ru(bpy)3]2+。

　　3、循环过程：上述化学发光过程后，反应体系中仍存在二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+和三丙胺(TPA)，使得电极表面的电化学反应和化学发光过程可以继续进行，这样，整个反应过程可以循环进行。

　　通过上述的循环过程，测定信号不断的放大，从而使检测灵敏度大大提高，所以 ECL 测定具有高灵敏的特点。上述的电化学发光过程产生的光信号的强度与二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+的浓度成线性关系。将二价的三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+与免疫反应体系中的一种物质结合，经免疫反应、分离后，检测免疫反应体系中剩余二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+经上述过程后所发出的光，即可得知待检物的浓度。