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1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟3.PBS洗净:3min*34.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS5.PBS洗净:2*5min6.羊血清封闭:37度,20分钟7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时8.4度 PBS洗净,3min*5次9.二抗 37度小于一小时