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亲和色谱法是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。
首先将载体在碱性条件下用溴化氰(CNBr)活化,再用化学方法将能与生物分子进行可逆性结合的物质(称为配基结合到某种活化固相载体上此过程称为偶联反应。
将偶联反应得到的亲和吸附剂装入层析柱中而形成亲和柱,溶液样品通过亲和柱时,生物大分子和亲和柱中的配基结合而被吸附在亲和吸附剂表面,而其他没有特异结合的杂蛋白可通过清洗而流出。
再用适当方法使这些生物大分子与配基分离而被洗脱下来,从而达到分离、纯化的目的。
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