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心型脂肪酸结合蛋白的作用及检测

2022.1.07
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xujinping

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  作用

  hFABP的几个生物学方面表明它可能是一种对心肌损伤的早期诊断有用的生物标志物:(1)在心肌中高浓度;(2)在细胞质中限制;(3)低分子量和面积小;(4)相对组织特异性;(5)与心脏以外组织中CK-MB的分布相似,以及(6)在心肌损伤后早释进入血浆和尿液。

  缺血损伤后快速出现hFABP表明它可能通过经内皮途径到达循环。几项临床观察结果表明这种蛋白质主要通过肾排除。症状发作后不久hFABP出现在患者的尿液中。

  hFABP的特征看似与肌红蛋白的相似。这两种在心肌和骨骼组织中表达的低分子量胞质蛋白是线粒体氧化的基质而且在症状发作后2小时内释放,6小时出现最大浓度,24小时内恢复基线浓度。然而,他们在心脏和肌肉组织中的浓度不同。心脏中hFABP浓度比骨骼肌中高2-10倍((净重0.5 vs. 0.05-0.2 mg/g)。与此相反,心脏细胞中肌红蛋白浓度比骨骼细胞中低2倍(2.5和4.0 mg/g净重)。肌红蛋白的正常血浆浓度(20-80 μg/l)比hFABP的(<5μg/l)高10-15倍。游离血浆肌红蛋白水平升高是被广泛接受的早期心肌损伤标志而且在1994年Bhayana等人证明了血浆肌红蛋白水平升高比CK-MB和cTnT水平升高在症状发作后3-6小时内排除急性心肌梗塞(AMI)上具有优越性。尽管在发表的几个准则中肌红蛋白被推荐为心脏损伤的早期标志物,但hFABP更加具有心脏特异性而且由于其生物学特性它可能被认为是一种更准确的诊断试验。

  如先前讨论的那样,hFABP和肌红蛋白还存在于骨骼肌中但是缺少心脏特异性。由于这些蛋白质在心脏和骨骼肌中不同程度地表达,肌红蛋白/ hFABP比率被用于更好地区别心脏和肌肉特异性损害。比值为5被认为具有心脏特异性而比值在21-70之间表明更倾向于骨骼肌损害。Furuhashi等人发现这个比值对肾功能障碍患者有用,他们确定hFABP/肌红蛋白比值为0.147是心脏病变的临界值。其他作者质疑肌红蛋白/hFABP比值作为一种有助于检测急性缺血性损伤的试验的优势。

  检测

  用两种hFABP特异性单克隆抗体通过夹心酶联免疫吸附法测定血浆和血清hFABP浓度。可以用全血样本进行一步免疫色谱分析法来快速测量hFABP;获得血清hFABP水平定性数据需要15分钟。利用面板试验,初步结果显示对AMI检测的灵敏度高(93%)但是特异性低(43%)。hFABP在血浆和血清中的正常范围根据试验和方法而定。1991年,Tanaka等人报告正常范围为0.0-2.8μg/l;1991年,Tsuji等人报告正常范围为0.0-0.6μg/l,而1997年,Wodzig等人认为正常范围是0.3-5μg/l。1995年,Ohkaru等人报告100位健康受试者的男女平均血浆hFABP水平分别为3.60±1.73和3.73±1.92 ng/ml。Hasegawa等人的报告中,儿童的基线血清hFABP水平与以前报道的成人基线血清hFABP水平一致(平均值= 3.8,范围= 1.9-5.5ng/ml)。在不同研究中临界浓度不同,从6.2 ng/ml到19μg/l。生理血浆hFABP浓度很可能由损坏的骨骼肌细胞不断释放这种蛋白质引起。

  用心脏尸检材料进行AMI病理确诊。可以用免疫-组织化学方法通过显微镜或肉眼诊断。对于显微镜测定,运用组织切片苏木精-伊红染色。对于宏观诊断,运用氮蓝四唑染色法;该技术反映这种酶的细胞内活动。在活组织中,这种酶把NBT转化成深蓝色不溶性色素(甲瓒),而梗塞组织不会被染色。在AMI后4-6小时后这两种技术都会变成阳性。抗hFABP抗体用于尸检材料可以作为症状发作后4小时内确诊梗塞的方法。Kleine等人和Watanabe等人证明抗hFABP抗体比苏木精-伊红或NBT染色法检测尸检材料AMI细微变化或非常微弱或最新(<4小时)AMI症状更灵敏。

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