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(1) 该法最常出现的问题是试剂失效或反应系统被污染。试剂中最不稳定的是NADH和谷氨酸脱氢酶。在分析过程中应注意以下几个方面：如用血浆则不能用含氟化合物或NH4+的抗凝剂，前者可抑制尿素酶活性，后者则可参与反应。
(2) 试剂空白吸光度应大于1.2A，否则说明NADH被氧化。同种试剂、仪器，在分析条件不变的情况下，测定得F值应相对恒定，否则说明试剂失效。
(3) 复溶试剂勿振动，以免酶变性失活。必须用无氨水复溶试剂。试剂杯、样品杯、反应杯要无氨、洁净、无酸碱污染，应每次定标，并跟测质控血清。
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