直接镜检
【采集标本】
采取标本是检验能否取得正确结果的关键。根据临床表现选取相应的标本。
鳞屑、菌痂：用钝刀刮取病损边缘的鳞屑。
病甲：先清除甲表面游离的污物，取甲板下靠近甲床上部的甲屑。
脓汁，渗出物及各种分泌物：直接用棉拭子采取。
毛发：用镊子拔取失去光泽和绕有菌鞘的病发、断发。
脑脊液、腹水、尿液、应离心后取沉淀。
放线菌病：寻找硫磺样的颗粒。
【制片】
(1)、将采集的标本置于载玻片上，加1滴10%氢氧化钾溶液，盖上盖玻片，
(2)、微微加温，避免煮沸，驱逐水泡，轻轻压薄成云雾状，吸去溢液，先置低倍显微镜下观察找到菌丝和孢子后，再用高倍镜证实。
【镜下观察】
菌丝在镜下粗细一致，绿色折光，有分隔，胞浆均匀，胞浆内可见大小不等的颗粒。孢子多为圆形或卵圆形，大小一致，可见孢浆内结构。
(1)、墨汁涂片：用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合，盖上盖玻片后直接镜检。
(2)、涂片或组织切片染色：涂片染色可更好地显示真菌形态和结构。革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等；瑞氏染色适用于组织胞浆菌；组织切片通常用PAS染色，多数真菌可被染成红色。
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