1、混匀操作要领
(1)火焰消毒吸管,用Hanks液冷却和湿润管内壁(这是因为刚分离的组织细胞易粘在管壁上)
(2)吸管头插入管底
(3)用吸管反复轻轻吹打组织块
2、器械的使用
(1)用工作台消毒镊子取浸泡在酒精中消毒的器械。
(2)器械置无菌干纱布内嚓一下。迅速通过火焰,冷却后使用。
(3)用过的器械置另一加盖的器皿中再消毒。
(4)器械按浸泡消毒的顺序使用。
(5)各套再消毒器械不可混用。
3、除去组织块多余水分
用吸管将组织块推向青霉素瓶一角,然后将有组织块的瓶面翻向上方,吸去流向对侧的多余水分。
注意:多余水分若不除去,会使组织块剪切不细,消化后的细胞悬液清亮(细胞数少),并可见消化液中有线状或絮状物漂浮。
4、细胞计数
(1)用吸管混匀待计数的细胞悬液。
(2)将一小滴细胞悬液从盖玻片与载玻片交界部位滴入细胞计数池中。
(3)沉降1分钟,低倍镜下计数血球计数板四大中格的结构完整的细胞,小细胞团计数为1。
(4)计数时,如果细胞压在格上,则数上不数下,数左不数右。然后按下式计算出每毫升悬液中的细胞数。
(四大中格细胞数/4)*10000=细胞数/毫升