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反转录酶的合成步骤介绍

2022.3.10
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事，把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

　　1、使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s

　　2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL

　　3、65℃保温5min，然后冰浴5min；

　　4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份

　　RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL

　　10×M-MLVReactionBuffer2μL

　　DTT（200mM）1μL

　　逆转录酶（M-MLV）1μL

　　5、轻轻混匀后，然后2000rpm离心20s；

　　6、先在37℃保温1hr，然后70℃保温15min；

　　7、上述产物可立即进行下一步的PCR反应或-20℃保存。

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