血液葡萄糖介绍:
血清葡萄糖,其测定方法有邻甲苯胺法、葡萄糖氧化酶法、已糖激酶法、葡萄糖脱氢酶法和干化学法。其中已糖激酶法为国际推荐的参考方法,但试剂比较昂贵,我国推荐的葡萄糖氧化酶法在国内外应用甚广,目前有些单位仍沿用邻甲苯胺法。
血液葡萄糖正常值:
(1) 空腹:
① 邻甲苯胺法(O-TB): 3.89-6.11mmol/L。
② 葡萄糖氧化酶法(GOD):3.89-6.11mmol/L。
③ 分光光度法(AAS): 3.88-5.8 mmol/L。
④ 自动生化仪: 3.89-6.11mmol/L。
(2) 进食后2h:<6.7mmol/L (<120mg/dl)。
血液葡萄糖临床意义:
(1) 升高:
① 胰岛素分泌不足:真性糖尿病。
② 糖类皮质激素增多:肢端肥大症、甲状腺功能亢进、库欣综合征、巨人症等。
③ 肾上腺素过多:嗜铬细胞瘤。
④ 肝摄取减少:肝硬化、重症肝炎、血色病。
⑤ 颅内压升高:脑外伤、脑瘤、脑出血、重症化脓性脑膜炎等。
⑥ 维生素B1缺乏:Wernicke脑病(脑性出血性脑灰质炎)。
⑦ 胰腺癌、急慢性胰腺炎、胰岛α细胞瘤等。
⑧ 应激状态:烧伤、休克、感情创伤、麻醉等。
⑨ 药物与化学毒物中毒:咖啡因、茶碱、ACTH、一氧化碳和重金属中毒等。
(2) 降低:
① 胰岛素分泌过多:胰岛β细胞瘤、胰外肿瘤(肾上腺癌、胃癌、纤维肉瘤)、倾倒综合征、早期糖尿病、功能性血糖过低症、滋养性血糖过低症、胰高血糖素缺乏症等。
② 对抗胰岛素的内分泌不足:垂体前叶功能减退症、艾迪生病、胰岛α细胞功能减退症、甲状腺功能减退症(呆小症、黏液性水肿)。
③ 肝脏葡萄糖供应不足:原发性肝癌、肝硬化后期、重症肝炎、重症脂肪肝、糖原贮积病(Von Gier Ke病)、半乳糖血症、长期营养不良等。
④ 其他:蛛网膜下腔出血、脑炎后综合征、荔枝病、亮氨酸过敏、食物摄入不足、运动、饥饿、药物(服用胰岛素或降糖药过量)。
血液葡萄糖注意事项:
(1) 葡萄糖邻甲苯胺(O-TB)法测定:
① 除葡萄糖外,其他糖在反应过程中亦能产生有色化合物,它们吸光度比率分别为:葡萄糖=1.00;果糖=0.06;甘露糖=0.96;半乳糖=1.42;蔗糖=0.16;麦芽糖=0.09;乳糖=0.39;木糖=0.12。但是,在这些糖中葡萄糖、果糖和半乳糖存在于正常人血清,而后者在正常人血液中含量甚微,不影响实际测定结果。
② 测定液的显色强度与反应条件有关,邻甲苯胺的批号、邻甲苯胺试剂的新、老(如试剂配制后过久,颜色变浅)以及加热温度和加热时间等都会影响显色强度。因此,测定管,标准管、空白管的加热时间与温度必须完全一致。每批测定管数不宜过多,以便能较好地控制反应条件。有些批号冰醋酸会产生棕色反应,影响测定结果。
③ 最终反应液偶尔会产生混浊,最常见原因是高脂血症。此时,可向3ml显色液中加入1.5ml异丙醇,充分混匀,溶解脂质可消除浊度,所测吸光度乘以1.5。注射右旋糖酐时,由于右旋糖酐不溶于邻甲苯胺试剂而产生混浊。冷水浴太冷时也可出现混浊。
④ 轻度溶血不影响测定,但1g/L血红蛋白能假性增高葡萄糖测定结果0.11mmol/L;342μmol/L胆红质能假性增高葡萄糖测定结果1.39mmol/L;血标本中含有EDTA(>1mg/ml),氟化钠(>5mg/ml)时,能增高显色强度,麝香草酚抑制颜色生成。
⑤ 邻甲苯胺法的测定结果基本上与葡萄糖氧化酶法和已糖激酶法相同,但尿毒症患者,邻甲苯胺法的测定结果略有偏高。
⑥ 邻甲苯胺试剂有毒并有致癌性,操作应避免皮肤接触或直接吸入。
(2) 葡萄糖氧化酶(GOD)法:
① 葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异,溶液中葡萄糖约36%为α型,64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要从α型到β型的变旋反应。国内某些商品葡萄糖氧化酶试剂盒含葡萄糖变旋酶,可加速这一反应,但在终点法中延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型,故须放置2h以上(最好过夜),待变旋平衡后方可应用。
② 葡萄糖氧化酶法测定的特异性较高,能干扰测定结果的物质很少,溶血标本血红蛋白的浓度达10g/L,黄疸标本胆红质浓度达342μmol/L。氟化钠浓度达2g/L,尿素浓度达46.7mmol/L(280mg/dl),尿酸浓度达2.95mmol/L,半胱氨酸的浓度达50mg/dl,甘油三酯浓度达500mg/dl,对测定结果均无影响,维生素C、谷胱甘肽、10mg/dl左旋多巴可能引起测定结果的负偏差。
③ 如果测血浆中糖,标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂较好。取草酸钾6g,氟化钠4g,加水溶解至100ml,吸取0.1ml到玻璃试管内,在80℃以下烤干使用,可使2-3ml血液在3-4h不凝固并抑制糖分解。
④ 方法学评价:GOD法线性范围至少可达19mmol/L;回收度94%-105%;变异系数批内为0.7%-2.0%;批间为2%左右;日间为2%-3%。准确度与精密度都能达到临床需要,操作简便,适用于常规检验。
血液葡萄糖检查过程:
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